赛默飞色谱及质谱
【药典】生物药-基于高分辨质谱、HCD 和 EThcD 碎裂的重度脂肪酸链修饰多肽解析
检测样品:重度脂肪酸链
检测项目:多肽修饰
方案概述:在一些文献中,单脂肪酸链的修饰分析已经做了介绍 [1],本文以某膜蛋白为例,讲解蛋白的油脂 + 单脂肪链混合修饰解析。
治疗和预防性重组蛋白药物通常具有丰富的修饰,例如糖基 化、磷酸化 / 硫酸化、酰胺化、乙酰化和脂质修饰。在这些修 饰中,脂质修饰的分析尤其困难。脂质修饰的蛋白以膜蛋白 为主,从单脂肪链修饰到甘油脂修饰都用于了生物药的研发。 其中,甘油脂 + 单脂肪链混合修饰的蛋白的表征非常困难。 一,脂修饰的蛋白,酶解得到的脂肽通常疏水性较强,从 而导致非常显著的色谱残留,为不同样品的分析带来挑战。 二,该脂质修饰的多肽分子量较大,较大分子量的碎裂是 对质谱碎裂模式的挑战。三,如何归属脂肽碎裂得到的碎片, 用于推导脂质修饰的结构。
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