赛默飞色谱及质谱
【药典】生物药-SCX-MS 用于复杂糖基化修饰蛋白的分子量分析
检测样品:糖基化修饰蛋白
检测项目:分子量
方案概述:本文使用强阳离子交换(SCX)实现蛋白异构体的分离,同时结合 SCX 的pH 洗脱后 native mass 检测的优势 [7],使得蛋白信号移向高质量端的优势,实现较为复杂糖蛋白的分子量直接检测。
几乎所有真核表达的蛋白都或多或少的包含了糖修饰。从广义 上来说糖修饰可以分为 3 种类型,一,由高尔基体在蛋白 的表达的过程中修饰导致,例如绝大多数的单抗(不是所有的 单抗都糖基化)、双抗、多抗、融合蛋白、部分重组蛋白等。 这一类修饰通常称为糖基化 [1]。二,通过一系列理化技术, 在特定氨基酸残基或基团上人为修饰的糖,例如多糖蛋白结合 疫苗 [2]。这一类修饰没有特定名称。三,在生物药发酵过程 中,通过氨基酸残基上的氨基与溶液中过剩的葡萄糖醛基发生 反应,从而实现的糖修饰 [3]。这一类修饰通常称为糖化。
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