标准中“烫水蛭（蚂蟥）配方颗粒的检测”，使用迪马色谱柱

【来源】 本品为水蛭科动物蚂蟥 Whitmania pigra Whitman 的干燥全体经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒。

【制法】 取烫水蛭（蚂蟥）饮片4000g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏（干浸膏出膏率为12.0%～20.0%），加入辅料适量，干燥（或干燥，粉碎），再加入辅料适量，混匀，制粒，制成1000g，即得。

【性状】本品为浅灰绿色至棕黄色的颗粒；气微腥。

【特征图谱】照高效液相色谱法（《中国药典》2020 年版通则 0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5µm）；以乙腈-0.2%磷酸溶液（0.5∶99.5）为流动相；流速为每分钟0.8mL；柱温为25℃；检测波长为270nm。理论板数按次黄嘌呤峰计算应不低于5000。

参照物溶液的制备  取水蛭（蚂蟥）对照药材1.5g，加水20mL，加热回流1小时，离心（转速为10000 转每分钟）10分钟，取上清液作为对照药材参照物溶液。另取次黄嘌呤对照品、尿嘧啶对照品，加10%甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液，作为对照品参照物溶液。

供试品溶液的制备  取本品0.3g，研细，加水10mL，超声处理10分钟，离心（转速为10000 转每分钟）10分钟，取上清液，即得 。

测定法  分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10µL，注入液相色谱仪，测定，即得。  

供试品色谱中应呈现与对照药材参照物色谱相对应的5个特征峰，其中2个峰应分别与相应对照品参照物峰的保留时间相对应，以次黄嘌呤参照物峰相应的峰为S峰，计算峰1、峰4、峰5与S峰的相对保留时间，应在规定值的±10%范围之内，规定值为：0.51（峰1）、1.41（峰4）、1.82（峰5）。