一韦仪器HG24高通量组织研磨仪高效破碎酵母细胞壁提取总蛋白实验方案

检测样品：酿酒酵母湿菌体

检测项目：高效破碎酵母细胞壁提取总蛋白实验

方案概述：建立一韦仪器HG24高通量组织研磨仪常温干磨法高效破碎酵母细胞壁，释放总蛋白。酵母细胞壁厚实，传统酶解或超声耗时且重复性差。采用垂直三维运动与氧化锆珠高速撞击，实现快速、低温、高重复性破壁，为蛋白组学分析提供稳定前处理。

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更新时间2026年05月12日

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冯伟-上海一韦仪器科技有限公司

实验目的
建立一韦仪器HG24高通量组织研磨仪常温干磨法高效破碎酵母细胞壁，释放总蛋白。酵母细胞壁厚实，传统酶解或超声耗时且重复性差。采用垂直三维运动与氧化锆珠高速撞击，实现快速、低温、高重复性破壁，为蛋白组学分析提供稳定前处理。

实验仪器和材料

· 仪器：一韦仪器HG24高通量组织研磨仪、2ml PE适配器（24孔）、1.0mm氧化锆研磨珠

· 材料：酿酒酵母湿菌体（含水量约70%）、PBS缓冲液、蛋白酶抑制剂

实验步骤

1. 称取湿菌体200mg至2ml研磨管，加入1.0mm氧化锆珠10颗。

2. 加入500μl PBS（含蛋白酶抑制剂），盖紧密封。

3. 设置研磨参数：频率65Hz，时间90秒。

4. 取出后4℃离心（12000g，10min），上清即为总蛋白提取液。

实验数据

结论
一韦仪器HG24高通量组织研磨仪通过垂直三维振荡与微珠撞击，90秒内破碎率＞95%，蛋白得率3.2mg/g湿菌，重复性好，优于传统超声法，适用于酵母蛋白组学前处理。

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