上海一韦仪器科技有限公司
一韦仪器HG24高通量组织研磨仪低温研磨酵母细胞提取RNA(避免降解)实验方案
检测样品:酿酒酵母湿菌体
检测项目:低温研磨酵母细胞提取RNA(避免降解)
方案概述:采用一韦仪器HG24高通量组织研磨仪低温功能(适配器预冷液氮),快速破碎酵母细胞同时抑制内源RNase活性,提取高质量总RNA。避免传统Trizol法手摇不均及超声产热降解问题,为RT-qPCR提供可靠模板。
一韦仪器HG24高通量组织研磨仪低温研磨酵母细胞提取RNA(避免降解)实验方案
冯伟-上海一韦仪器科技有限公司
实验目的
采用一韦仪器HG24高通量组织研磨仪低温功能(适配器预冷液氮),快速破碎酵母细胞同时抑制内源RNase活性,提取高质量总RNA。避免传统Trizol法手摇不均及超声产热降解问题,为RT-qPCR提供可靠模板。
实验仪器和材料
· 仪器:一韦仪器HG24高通量组织研磨仪、2ml冷冻适配器(预冷液氮)、1.0mm铬钢珠
· 材料:酿酒酵母湿菌体、Trizol试剂、氯仿、异丙醇
实验步骤
1. 将2ml研磨管装入200mg湿菌体及10颗1.0mm铬钢珠。
2. 适配器浸入液氮1.5min,取出快速固定于主机。
3. 设置研磨:频率60Hz,时间120秒。
4. 取出后立即加入1ml Trizol,后续按标准步骤提取RNA。
实验数据
结论
液氮预冷适配器配合一韦仪器HG24高通量组织研磨仪垂直振荡,酵母在全程低温下有效破碎,RNA完整性高、无降解,得率稳定,是酵母转录组分析的首选前处理方式。
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