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上海北诺生物科技有限公司
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2013年
09月 -
目前市场上几种代表性的核酸染料：GelRed是一款集高灵敏度、低毒性和光稳定性于一体的核酸凝胶染料。由于染料分子不能透过人体细胞膜，保证了实验环境的安全与洁净。该产品已通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，不会造成任何环境污染。EB（溴化乙啶）是早期分子实验中常用的小分子核酸凝胶染色剂，但染色效果并不灵敏，背景荧光信号太强，分辨率不高。zui重要的EB是一种高诱变性致癌的化学物质。SYBRGreenI和SYBRGold也被厂家宣传为灵敏的凝胶染色试剂。但SYBRGreenI尤其是SYB【查看全文】
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04
2013年
09月 -
生物素酰化探针的检测实验标签：生物素酰化探针与放射性标记探针的比活不同，生物素标记探针的可检出性在于每千碱基对中掺入的生物素分子的数量，它可用比色法检测。实验方法比色法化学发光法实验材料DNA试剂、试剂盒磷酸酶缓冲液封阻液牛血清蛋白TENBT仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1.用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2、5、10和20pg/μl。以同样稀释液处理待测DNA。2.对干硝酸纤维素滤膜：每个稀释度取1μl点膜，在80℃供干约1h接步骤4。3.对于足龙膜：每个稀【查看全文】
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2013年
09月 -
标签：生物素酰化探针在标准的切口平移实验体系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验方法切口平移法随即寡核苷酸引物合成法实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤1.混合以下物质于100μl反应体积：（1）10μl10×大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ缓冲液（2）10μl0.5mmol/l3d【查看全文】
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2013年
09月 -
标签：聚合酶重组DNA利用聚合酶链式反应（PCR），任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸，可在连接处产生所需要的读码框架或酶切位点。用该技术并不需要知道待亚克隆的DNA的核苷酸序列，只需要知道两小段伸展于片段两俩的区段作为扩增反应的引物结合区。实验方法基本方案实验材料DNA试剂、试剂盒TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材电泳仪离心机PCR仪实验步骤1.制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10min以灭活核酸酶。2【查看全文】
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2013年
09月 -
标签：T4DNA聚合酶T4DNA聚合酶具依赖人为模板的聚合酶活性，同时具有对单链、双链DNA的3’到5’端的外切酶活性，缺少5’到3’端的外切酶活性。实验方法T4DNA聚合酶实验材料DNA试剂、试剂盒Trish·CldNTPMgCl2BSADTT仪器、耗材水浴锅实验步骤一、50μl反应体积：（1）50mmol/lTris·Cl，pH8.0（2）5mmol/lMgCl2（3）5mmol/lDTT（4）100μmol/l4dNTP混合液（5）50μg/mlBSA（6）0.1UT4DNA聚合酶（7）2【查看全文】
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2013年
08月 -
1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子；2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30ml）；3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染料，轻轻旋转以充分混匀凝胶溶液，倒入电泳槽中，待其凝固；4.室温下30~45分钟后凝胶*凝结，小心拔出梳子，将凝胶安放在电泳内槽；5.向电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶面1mm为宜，如样品孔内有气泡，应设法除去；【查看全文】
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2013年
08月 -
DNA实验技术：基因转染（磷酸钙-DNA共沉淀法）磷酸钙-DNA 共沉淀法
磷酸钙-DNA共沉淀法核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合，在细胞中进行稳定表达，基因转导的频率大约为10-4，这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。此方法对于贴壁细胞转染是zui常用并的方法。1、配液（1）2×HBS1.63gNaCl1.19gHepes0.023gNa2PO4、2【查看全文】
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2013年
08月 -
（一）原理DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质，在595nm波长处有zui大吸收。DNA在40-400μg范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以提高反应灵敏度。（二）试剂及器材1.DNA标准溶液准确称取小牛胸腺的DNA钠盐，以0.01mol/LNaOH溶液配成200μg/mL的溶液。2.测定样品溶液准确称取干燥的DNA制品【查看全文】
