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上海北诺生物科技有限公司
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2015年
09月 -
实验试剂生理盐水（或PBS）弗氏*佐剂（Freund’scompleteadjuvant，FCA）弗氏不*佐剂（Freund’sincompleteadjuvant，FIA）二甲苯，酒精棉，脱脂棉，2%NaN3实验设备剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器（1ml、10ml，25ml）附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶（200ml）或平皿（直径18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等。实【查看全文】
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2015年
09月 -
实验原理分子生物研究中，zui常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因植物拷贝数的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nicktranslation)当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coliDNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用放射性核苷酸代替原先无放【查看全文】
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2015年
09月 -
实验原理线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。实验试剂1.l／300詹纳斯绿B染液2.Ringer氏液(哺乳类用)实验设备1.显微镜2.手术器材一套3.解剖盘4.小平皿5.载片6.盖片7【查看全文】
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2013年
10月 -
DNA段的克隆需要合适的载体，载体或是质粒，或是噬菌体，或是病毒，通常大多经过人工改造[地的。作为载体必须具备两条件：一是该载体在细胞内必须能自主复制，即必须具备复制原点；二是该载体必须具备适合的酶切位点，且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条，保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获得阳隆克隆，载体上常有筛选标记，如对抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。一、质粒常用的有pBR322，pUC系列质粒等。（一）pBR322质粒是4362bp的环状双链DNA载体，有2个抗药性基因（四环素和【查看全文】
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2013年
10月 -
早期的基因组DNA甲基化分析技术，如SssI甲基转移酶分析法、氯乙醛反应法、免疫学抗体技术等，已经不能满足现代表观遗传学研究的需求。今年来常用的基因组甲基化的方法有以下两种。1.甲基化敏感扩增多态性实验甲基化敏感扩增多态性实验技术被用于检测双向型真菌的DNA甲基化，它是在扩增片段长度多态性技术的基础上建立起来、基本程序是：提取高质量的基因组DNA，分别用EcoRⅠ/HpaⅡ，EcoRⅠ/MspⅠ两种酶组合对基因组DNA进行双酶切，并连上相应的限制性内切酶的接头，然后以接头序列设计的预扩增引物，进【查看全文】
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2013年
10月 -
基因突变是遗传物质分子结构的改变，包括在DNA分子编码区的密码子和密码阅读框的改变。基因突变可以发生在体细胞，也可以发生在生殖细胞中，这两种突变有*不同的后果。发生于生殖细胞中的基因突变可以遗传给后代。发生于机体其他组织细胞中基因突变的体细胞突变，可以引起发生突变个体的形态或生理上的变异，只能通过无性生殖的形式传递给后代，而不能通过有性生殖遗传下去（在胚胎细胞发育时期出现的情况例外）。1．突变的稀有性基因突变的稀有性是指在正常情况下，突变率（mutationrate）往往是很低的。所谓突变率是指【查看全文】
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2013年
10月 -
从组织中获取DNA难吗？不难，真不难。高一就有开设的从鸡血中获取DNA的生物实验课，很简单的几步就可以得到DNA。但要想获取高质量的DNA，尤其是从一些富含多糖、多酚、淀粉、纤维和蛋白的组织，后面用于酶切、高通量测序大片段文库的构建,还是有一定的难度的。zui近协助北京农业生物技术研究中心一个老师提取桃叶片DNA还是遇到了一些困难，因为老师要做桃的个体重测序，因此对DNA的要求还是非常高的。之前跟其他很多老师交流植物DNA的提取，大多数目前仍然使用CTAB法，有些老师购买试剂盒进行提取，其实很多【查看全文】
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2013年
10月 -
1、PCR产物测序时出现重叠峰问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序结果移码）图1-1图1-2解决方法：将PCR产物克隆到质粒（如T载体）中挑单克隆测序，或将PCR产物进行PAGE纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进行测序。问题图2（PCR产物不纯，含部分序列一致的两种以上的片段，长度不一）图2解决方法：主要原因是PCR产物没有纯化，含有部分序列一致的两种以上长度不一的片段，将PCR产物进行PAGE纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进【查看全文】
