罗丹明 B（Rhodamine B），是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。易溶于水、乙醇， 微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液。呈红色至紫罗兰色粉末，水溶液为蓝红色，稀释后有强烈荧光，醇溶液有红色荧光。也可作为食品染色剂使用，但在 2017 年 10 月世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，罗丹明 B 在 3 类致癌物清单中。因此，本文参考《BJS 201905 食品中罗丹明 B 的测定 》，建立了使用谱育科技的超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪测定食品中罗丹明 B 含量的快速且高灵敏度的检测方法。

实验部分

仪器：ULC 510 超高效液相色谱仪（具体配有二元超高压输液泵、超高压自动进样器（含冷却功能）、柱温箱）、EXPEC 5210 三重四极杆串联质谱仪。

标准品：罗丹明 B（纯品，液体），购自 A ChemTek, Inc.，于-20℃冰箱保存。试剂：超纯水，甲酸为色谱级（CNW），甲醇(色谱级，美国 TEDIA)。

液相和质谱条件

监测模式为多反应监测(MRM)，各化合物监测离子对、碰撞电压(CE)等参数见下表

线性和检出限

      用甲醇稀释得到一系列浓度的罗丹明 B 标品(0.5ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/ml、20ng/ml),按照上述方法进样，以各目标物的定量离子色谱峰面积（Y）为纵坐标， 目标物标准溶液的质量浓度(X)为横坐标，权重系数为 1/x，采用外法拟合后的标准曲线如下

图 1 所示。标准曲线低点定量离子色谱图如图 2 所示，配置 0.5ng/ml 标准溶液进样，按照S/N=10 和 S/N=3 计算定量限和检出限，结果如下表 1 所示。且本实验的检出限全符合《BJS 201905 食品中罗丹明 B 的测定》的要求。

图 2 罗丹明 B 的定量限的色谱图（0.5ng/ml） 

重复性

      分别配置 0.5 ng/mL 和 5ng/mL 不同浓度对照品，分别连续进样 6 次，考察保留时间和响应的重复性。

      0.5ng/ml 重复性：保留时间和响应的 RSD 值分别是 0.00%和 1.9%。

      5ng/ml 重复性：保留时间和响应的 RSD 值分别在 0.00%和 6.9%之间。

      可知所有化合物的保留时间和峰面积均在 6.9%以下，精密度较好。

结语

      样品经提取等前处理过程，使用 LC-MS/MS 系统进行测定。本文考察了方法的线性、精密度、灵敏度等，结果表明: 罗丹明 B 在检测范围内线性良好，相关系数均大于 0.99；方法精密度在 6.9%以内，灵敏度符合国家标准要求。使用高灵敏、高抗污染能力的 EXPEC 5210 系统，可以对食品中罗丹明 B 含量进行灵敏、准确的定量检测。

• 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪

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