一、     氨基酸介绍

氨基酸，是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物，氨基酸分子中含有氨基和羧基两种官能团，与羟基酸类似。但经蛋白质水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸，而且仅有二十二种，包括甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸（蛋氨酸）、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、硒半胱氨酸和吡咯赖氨酸（仅在少数细菌中发现），它们是构成蛋白质的基本单位。

二、     水解氨基酸与游离氨基酸区别

氨基酸在生物体中主要有两种形态存在，一种是游离氨基酸指以游离态存在的单个氨基酸分子，可被直接吸收利用；而水解氨基酸，其检测需要通过酸水解，将待检产品中的蛋白质、多肽等氨基酸链水解成单个氨基酸，因此，水解氨基酸反映的是产品中所有氨基酸单位（单个或多个）的组成。

三、     水解氨基酸的前处理方法

蛋白质是一分子氨基酸的 α-氨基和另一分子的α-羧基脱水缩合形成肽键而连接起来的多聚物。 因此,确定一个蛋白质的氨基酸组成需要两个步骤: 

步水解：即将蛋白质充分水解，肽键打开，释放出单个氨基酸，并回收得到;

第二步分析：即利用色谱技术对水解产物进行定性和定量分析，以确定 氨基酸的种类及其含量。步水解是决定氨基酸分析成功与否的关键。分析样品种类繁多，来源各异，有动物性样品，如动物的组织、代谢物等，有植物性样本，如植物的根、种子等，有食物药物性样本，如酱料、疫苗等， 有矿物性样本，如土壤、化石等。 但凡含有蛋白质的物质都可以作为分析样品。分析样品的多样性就造成了样品前处理的复杂性。有研究显示，水解的不合理是影响氨基酸分析正确性的首要原因。

由于氨基酸回收的复杂性，没有哪种方法可以做到无损失的将所有氨基酸都进行回收，所以要针对不同类型的氨基酸来选择适合的前处理方法。主要有酸水解、氧化水解、碱水解、和酶水解。以下是针对常用的前两种进行了介绍。

A.       酸水解法:

酸水解法是氨基酸分析中的前处理方法，其中 22种氨基酸中大多数可采用酸水解法，即用6M高纯度的盐酸将蛋白质裂解成单个游离氨基酸，随后用真空离心浓缩仪把残留的盐酸蒸发去除。

图1 水解法测试氨基酸流程图

B.       氧化水解法：

半胱氨酸、蛋氨酸因其在酸水解中会产生多级氧化产物，推荐使用氧化酸水解法。

图2 氧化水解法测试氨基酸流程图

上述两种水解方法，都会使用到6M HCL进行水解22-24小时，水解后的氨基酸需要取1-2ml溶液放在真空离心浓缩仪中浓缩蒸干，加入2ml水后就继续浓缩蒸干，重复两次上述操作，以保证去除盐酸。高浓度盐酸去除时，由于6M盐酸的强腐蚀性，常规的浓缩仪的管路、真空泵、腔体等部件容易被腐蚀，所以一款真正耐盐酸的浓缩仪是减少实验室成本的关键。

四、     传统浓缩方式VS真空离心浓缩

传统浓缩干燥方式的瓶颈 

Ö  部分氨基酸损失：实验室传统赶酸方式多用加热板高温加热，通常加热温度在100°C以上这可能会导致部分氨基酸，如半胱氨酸（Cys） 和蛋氨酸（Met）受热损失；

Ö  赶酸时间过长：通常持续数个小时

Ö  盐酸污染及蒸汽腐蚀严重：由于整个过程盐酸无法进行回收，这将会导致盐酸蒸汽腐蚀通风厨，同时人员也有吸入风险。

离心浓缩法优势：

ü  低温快速去除：真空离心浓缩仪利用当腔体内压力降低时，溶剂的沸点也随着降低。当压力降到一定程度时，在比较低的温度条件下，溶剂便可以沸腾蒸发。为了避免样品暴沸和交叉污染，采用高速离心旋转技术，保证样品处于样品管中不会喷出。

ü  盐酸蒸汽回收：真空离心浓缩仪配备了低温冷阱，运行温度可达-60℃或者更低，可将盐酸蒸汽捕捉，不用担心污染问题。

ü  自动化程度高，可无人值守。

无需人员干预，结束后，运行自动停止。

ü  高通量，一次处理几十甚至上百个样品

对于平行性及多个样品的要求，非常适合实验室内大批量样品的处理，简化实验流程的同时，也节约时间。

Ø  兼容多种样品瓶，例如：孔板、小瓶、离心管、EP管、试管

转子种类几十种，满足市面上大部分浓缩需求；同时可拓展其他应用，如实验室中常见的农残、兽药残留的检测等

五、     吉艾姆Auto R2耐酸型真空离心浓缩仪介绍

图2吉艾姆Auto R2耐酸型真空离心浓缩仪

吉艾姆Auto R2耐酸型真空离心浓缩仪/平行蒸发仪，用来对样品进行浓缩、纯化、干燥、储存、冻干等。利用溶剂在低真空度下沸点的降低，配合较高的转速产生向心力，使得浓缩时间缩短，并使产物可保持贴壁状态。

吉艾姆Auto R2耐酸型真空离心浓缩仪仪器特点：

1.     耐盐酸处理：

1.1   整机耐盐酸特氟龙喷涂：为耐受高浓度盐酸，Auto R2主机内腔和冷阱均采用美国杜邦特氟龙喷涂；

1.2   哈氏合金轴承设计：直驱轴承部分进行升级，使用具有优秀的耐盐酸性能的哈氏合金

1.3   玻璃肼回收盐酸：冷阱内置玻璃肼回收，减少盐酸暴漏在冷阱中的风险。

1.4   纯陶瓷的真空计

2.     玻璃视窗：随时观察样品浓缩情况

3.     两段温度控制：加快浓缩的同时，又更好的保护样品安全

4.     4组快捷程序，30组用户使用程序。

5.     多重样品安全防护：真空度未达标报警功能，断电自动泄真空功能，运行完毕门盖自动开启功能，废气排空功能。

6.     可存储30组运行程序，4组实体按键快捷程序，具有一键预冷预热功能，具有一键程序快进功能，操作面板可消毒处理。

• 耐酸型真空浓缩仪

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