珀金埃尔默企业管理（上海）有限公司
使用FL 6500荧光光谱仪和NanoOrange染料进行蛋白质定量
检测样品：NanoOrange染料
检测项目：蛋白质定量
方案概述：使用珀金埃尔默FL6500™荧光光谱仪监测NanoOrange®荧光团与BSA非共价相互作用时观察到的荧光增强，并构建了标准曲线。
自1982年第一款重组蛋白药物进入市场(第一款人胰岛素1实现商业化)以来，生物制药领域见证了蛋白质治疗药物数量的持续扩大。例如，单克隆抗体(mAb)、生长因子、激素是目前用于治疗癌症、HIV、多发性硬化症等多种疾病的生物治疗药物2。这些生物治疗药物的复杂生产工艺涉及精确的蛋白质定量，以确保最终配方的疗效和质量。此外，蛋白质还是研究酶活性、基因表达调控、信号通路和疾病机理的各种生物分子检测的关键成分。所有执行这些检测的实验室均会进行蛋白质定量分析，以揭示复杂的生物分子机制。
根据所需的精度、动态定量范围、与潜在污染物(洗涤剂、还原剂和溶剂)的相容性以及蛋白质间的差异，目前有多种方法可用于蛋白质定量。这些方法包括直接蛋白质紫外吸收测量法(A280)、铜基测定法(BCA和Lowry方法)、蛋白质-染料复合物吸收(Bradford)、荧光基测定和更复杂的测定，如ELISA或Western-Blot测定。
在本研究中，选择荧光法是基于其优异的灵敏度、特异性以及特别适合于复杂生物样品中低丰度蛋白质的检测。使用珀金埃尔默FL 6500™荧光光谱仪监测NanoOrange®荧光团与BSA非共价相互作用时观察到的荧光增强，并构建了标准曲线。
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