本方案适用红曲及其制品、中药材、中成药剂、食品等不同基质的样品中桔青霉素的测定。

(1) 磷酸盐缓冲溶液(PBS)：称取8.0g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2glvhuajia，用水溶解，调节pH至7.0，用水定容至1000mL；

(2)0.1%吐温20-PBS溶液(PBST)：准确移取1mL吐温20，用PBS缓冲溶液定容至1000mL；

(3)0.1%磷酸水溶液：准确移取1mL磷酸加水定容至1000mL。

称取经充分粉碎混匀的试样5.0g(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入25mL提取试剂，超声30min，再涡旋振荡5min，4000rpm下离心5min，准确移取上清液2.0mL，加38mL磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液稀释并混匀，待净化。

ProElut^® CIT IAC 3mL 20/pk (Cat.#: 67128)

(1)活化：将50mL注射器连接于免疫亲和柱上端，弃去保护液；

(2)上样：全部上样液以1-2滴/s的流速通过免疫亲和柱，弃去流出液；

(3)淋洗：加入10mL PBST溶液淋洗柱子，弃去全部流出液与柱管中水分；

(4)洗脱：加入1.0mL甲醇进行洗脱，流速为1-2滴/s，收集全部洗脱液于玻璃试管中，待检测。

色谱柱：Diamonsil^® C18(2), 150x4.6mm, 5μm (Cat.#: 99601)

流速：1.0mL/min

进样量：20μL

柱温：30℃

检测器：激发波长350nm, 发射波长500nm

流动相：乙腈:0.1%磷酸水溶液=40:60