大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒 返回列表页

大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒（CTAB沉淀法）

产品货号：11020

产品规格：50T/100T

产品简介：

大肠杆菌( Escherichia coli,E.coli)属于革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米周生鞭毛,能运动,无芽孢,能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3.获得DNA的量很高,但是纯度一般,但足够用于大多数分子生物学实验。

大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒CTAB沉淀法是简便的利用CTAB取大肠杆菌基因组DNA的试剂盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与DNA分离,乙醇沉淀核酸获得基因组DNA,可进行酶切、PCR等下游实验。该试剂盒仅用于科研领域,不用于临床诊断或治疗。

产品组成：

操作步骤：

1. 准备工作:取TE buffer,加至蛋白酶K中,充分混匀,配制成20mg/ml的白酶K溶液,可分装成小份,20保存1年有效。

2. 取菌液置于EP管中,离心,弃上清液。再次加入1.5m菌液,重复该步骤一次。

3. 加入Eco裂解液和3μl白酶K溶液(20mg/ml),充分混匀,37℃孵育1h。

4. 加入CTAB沉淀液,充分混匀,65℃孵育10min

5. 加入780蛋白清除液,充分混匀,12000g离心5~10min

6. 转移上清至新EP管中,加入2倍体积的Eco漂洗液,混匀,20℃放置30min或过夜。

7. 13000g离心10min,弃上清液,加入70%乙醇洗涤沉淀

8. 13000g离心10min,弃上清液,室温干燥DNA沉淀,加入100或适量 TE buffer溶解沉淀,20℃保存。 TE buffer体积越大,DNA浓度越低。

注意事项： 

1. 用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜，裂解越好，收获量越大。

2. 为了您的安全和健康，请穿戴一次性手套操作。

有效期：6个月有效。