DNA产物纯化试剂盒 返回列表页

DNA产物纯化试剂盒

产品货号：27100

产品规格：50次/100次/200次

产品简介：

  DNA产物纯化试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方，通过快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液（酶切，连接，探针标记等）中纯化回收70 bp-30 kb的DNA片段，每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA，同时最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高，完整性好，回收率高，可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。

包装清单：

自备试剂：50次自备36ml无水乙醇/100次自备72ml无水乙醇/100次自备144ml无水乙醇

操作步骤：

1. 将估计DNA反应液的体积，加入5倍体积的 Buffer PG，充分混匀（无需去除石蜡油或矿物油）。

注意：如DNA反应体系为50µl(不包括石蜡油体积)，则加入250 µl Buffer PG。

2. 柱平衡：向已装入收集管（Collection Tubes）中的吸附柱（Spin Columns）中加入200μl Buffer  

3. PS，12000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

4. 将步骤3或4所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置2分钟，12000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

5. 向吸附柱中加入450 μl Buffer PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

注意：如果纯化的DNA用于盐敏感的实验（例如平末端连接或直接测序），建议加入Buffer PW静置2-5分钟再离心。

6. 重复步骤4。

7. 12000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。

将吸附柱放到一个新的1.5 ml离心管（自备）中，向吸附膜中间位置悬空滴加50μlBuffer EB，室温放置2分钟。12000 rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。

注意事项：

1. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。

2. 所有离心步骤均可室温下进行。