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上海宝叶生物科技有限公司
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gⅥ-cDNA融合噬菌体ELISA
2013-1-4 阅读(1029)
[方法]
1．用200ul PBST冲洗链霉素包被的微量浓度测定板的每个孔3次。
2．在2mol/LPBS中稀释生物素配体（BAS噬菌体—ELISA）或生物素捕获抗体（ISA噬菌体—ELISA），直到终浓度为10—50nmol/l，再加100ul这种溶液到农度测定板中的每个孔中。
3．在室温下孵育浓度测定板1小时。
4。用200ul PBST冲洗每个孔5次。
5．在2mol/LPBS中稀释噬菌体溶液到浓度为1×1011TU/ml，在*次用来稀释IAS融合噬菌体的2mol/LPBS中加入诱饵血清或预免疫血清，再将100ul这种悬浮液转移到每个孔中。
6．在室温下孵育浓度测定板2小时。
7，用200ul PBST冲洗每个孔5次。
8。加100ul HRP/抗M13连接物（PBS2M稀释为1：5000）。
9。室温下孵育浓度测定板l小时。
10．用200ul PBST冲洗每个孔5次。
11．向每个孔中加100ul TMB底物溶液。
12．室温下孵育浓度测定板15～30分钟（或直到颜色发生变化）。
13．用100ul 2 mol/L H2SO4停止反应。
14．在450nm读吸收值。
