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上海宝叶生物科技有限公司
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蛋白转染是一种将外源蛋白导入细胞的技术,广泛应用于基因功能研究、药物开发和基因治疗等领域。为了确保蛋白质转染的效率和安全性。一、质粒DNA的提取与纯化1.避免内毒素污染:在提取过程中,要特别注意去除内毒素,因为内毒素会影响细胞的生长和转染效率。可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒。2.定期检测质粒质量:通过凝胶电泳或光谱光度计定期检测质粒的纯度和浓度,确保其满足转染要求。二、细胞培养的优化1.选择合适的细胞系:根据实验目的选择合适的细胞系,常用于瞬时转染,而Hela细胞则适合稳定转染。2.控制细胞生
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深入研究像Vero这样的细胞系会引发几个问题:Vero细胞到底是什么?Vero细胞系是如何建立的?“Vero”这个名字背后有什么故事?本部分旨在阐明Vero细胞的起源和主要属性。Vero细胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲绿猴的肾上皮细胞。这个品系是由日本千叶大学的Y.Kawakita和Yasumura培育的。“Vero”一词源自世界语中的“Verdareno”,翻译成“绿色肾脏”,尽管“Vero”也与“真理”的概念产生了共鸣。Vero细胞通常形成单层,但可以适应悬浮培养,显示出上皮样结
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什么是琼脂糖珠?琼脂糖珠是具有不同粒径和浓度的水凝胶。琼脂糖由琼脂二糖的重复单元组成。琼脂糖珠通常是交联和多孔的,因此蛋白质可以流过珠子。这些珠子可用于尺寸排阻或亲和层析。对于亲和层析,配体(如NTA或IDA)共价连接到琼脂糖珠聚合物上,因此标记的蛋白质可以与其他蛋白质分离。几十年来,琼脂糖基质一直用于蛋白质纯化,并且各种基于琼脂糖的基质是可商购的。不同基质之间的物理性质差异很大。德国CubeBiotech是一家专注于蛋白相关产品的生产商和服务商,尤其擅长于蛋白纯化及膜蛋白纯化。CubeBiot
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dsGreen是一种特异性结合双链DNA的荧光染料。染色方案有三种变体:凝胶浸泡、凝胶预染色和样品预染色。凝胶浸泡琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶的经典方法。在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中运行样品。在烧杯中,将10µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至100mL1×TE、TBE或TAE缓冲液(对于小型凝胶),或将50µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至500mL1×TE、TBE或TAE缓冲液(用于中型凝胶)。用抹刀、棒或磁力搅拌器充分混合。将稀释的dsGreen溶液倒入适当的托盘或平
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在某些情况下,蛋白质染色的影响可能会干扰后续分析。例如,当需要酶活性时,考马斯染色;或者当氨基酸的共价修饰会产生虚假结果时,在氨基酸分析之前进行银染色。在这些情况下,通常使用“导向带”。引导条是与待分析泳道平行的泳道,包含尺寸标记或重复样品。凝胶运行后,将导带剪下并染色,然后与凝胶重新对齐并用作模板来引导条带切除。该技术很简单。常见的错误是染色后未能用电泳缓冲液重新平衡凝胶。由于许多污渍会导致凝胶收缩或膨胀,重新平衡对于准确和一致的重新调整是必要的。在引导带技术中,平行泳道被切除并染色以引导带切
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图1.DNA大小选择工作流程。混合:将MagVigen™纳米颗粒与DNA/RNA样品混合。结合:与样品混合时,MagVigen™纳米颗粒会结合所需的DNA/RNA大小片段。这种相互作用依赖于DNA/RNA分子和纳米粒子表面之间的多种因素,例如电荷-电荷相互作用、亲水/疏水相互作用、范德华力和其他分子间力。NVIGEN对磁珠的表面化学和缓冲环境进行了设计,为所需的DNA大小片段选择提供理想的相互作用。清洗:珠子响应磁力(通过使用磁铁,例如磁力分离架),使结合的材料能够快速有效地与样品的其余部分分离
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膜蛋白质组和分泌蛋白组被认为是很大和很重要的蛋白质类别之一。膜蛋白被定义为与细胞膜或细胞内细胞器相关或附着的蛋白质。它们分为外周蛋白和整合蛋白。外周膜蛋白暂时与脂质双层相关,但不全跨越膜。与脂质双层的附着是通过外围区域的穿孔或通过与整合膜蛋白偶联来实现的(参见图3,B和C)。这些整合蛋白被嵌入,跨越整个脂质双层,并包含驻留在膜内的疏水性α螺旋或β桶结构。根据它们的细胞功能,它们可以进一步细分为受体或通道等组。与亲水性的胞外和胞内结构域一起,大多数膜蛋白表现出两亲性特征。两亲性特征还产生一种特征,
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一、简介低聚木糖,又称木寡糖,是由2~9个木糖单元,以β-1,4糖苷键连接而成的低聚糖混合物。S11137-25g低聚木糖BR,95%25g80.00现货S11137-100g低聚木糖BR,95%100g180.00现货S11137-500g低聚木糖BR,95%500g700.00现货二、功效和应用低聚木糖不仅能量低,而且具有许多有益功效:1.促进有益菌双歧杆菌增殖,同时产生多种有机酸,降低肠道pH值,抑制有害菌生长;2.低聚木糖的摄入,可减少有毒代谢产物形成,从而减少了肝脏分解毒素的负担;3.