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上海宝叶生物科技有限公司
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gⅥ-cDNA噬菌粒文库小规模的获取和纯化
2013-1-4 阅读(1058)
[方法]
1．将克隆体接种到100ul LBAT 96孔培养板上，并在37℃过夜振荡培养（180r/min）。
2．使用96孔复制板将其接种到装有200ul LBAT的第二块96孔培养板上，在37℃培养直到生长中期（大约1，5小时）。
3．在每一孔中加入10ul 2×1011TU/mlR408辅助噬菌体。
4．37℃无振荡培养30分钟。
5．37℃过夜振荡培养。
6．4℃800g离心20分钟，收集细胞。
7．将上清液转移到一新的96孔培养板上，并加40pul PEG/NaCl。
8．将板放置于冰上1小时。
9．4℃800g离心20分钟，收集噬菌体颗粒，小心除去上清液，在50ulPBS溶液中打散颗粒。
