Annexin V染色液-FITC

Annexin V染色液-FITC

Annexin V染色液-FITC

Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。Annexin V 搭配 PI 或 7-AAD、DAPI 等 DNA 染色液使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。

实验操作指南步骤 

1． 细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300 g 离心 5 min，弃上清，收集细胞，PBS 洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。注：本品仅在悬浮培养的细胞中验证，良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。 

2． 取 1~5 × 105重悬的细胞，300 g 离心 5 min，弃上清。用 PBS 洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500 μL 稀释的 1 × Annexin V Binding Buffer 工作液重悬细胞。 

3． 细胞悬液中加入 5 μL 的 Annexin V-FITC 染色液和 5 μL 的细胞核 DNA 染色液。 

4． 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育 15~20 min。 

5． 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于 1 小时内完成检测。 

保存条件 

2~8°C 可保存 1 年。Annexin V-FITC 染色液需要避光保存。

 注意事项 

1. 保质期 1 年，为获得最佳的使用效果，请在 3~6 个月内使用，Annexin V-FITC 禁止冷冻保存。

   
   

2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。

3.  荧光物质均易发生淬灭，进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，操作和存放过程尽量注意避光保存。

4.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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