Caspase 3活性检测试剂盒

Caspase 3活性检测试剂盒

Caspase 3活性检测试剂盒 采用分光光度法，可用于检测细胞、组织裂解液或纯化的 Caspase 3 活性。

Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain，属于Caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily)，是细胞凋亡过程中的一个关键酶，也是哺乳动物细胞中研究最多的一个Caspase。Caspase 3可以剪切pro-Caspase 2、6、7和9，并可直接特异性剪切许多Caspase 底物，包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of Caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。这些由Caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外，Caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatin condensention)、DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时Caspase 3对细胞起泡(Cell blebbing)也起到关键作用。Caspase 3在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase 3被激活，活化的Caspase 3由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase 3分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase 3序列特异性的多肽（Ac-DEVD-pNA (acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide）偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被Caspase 3剪切后，黄色发光基团pNA游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405 nm 或400 nm）测定其吸光值，通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性。

注意事项 

1. 保质期 1 年。为获得最佳的使用效果，请在 3~6 个月内使用。

2. 因裂解液中含有还原剂，不适合使用 BCA 法测定蛋白浓度，测定蛋白浓度时推荐使用  Bradford 蛋白浓度测定试剂盒

3. 有文献报道少数类型的细胞凋亡检测不到 Caspase 3 的激活。可能存在非依赖于 Caspase 3 活化的机制，这种情况下利用本试剂盒检测 Caspase 3 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
   

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