小鼠结肠平滑肌原代细胞

小鼠结肠平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠结肠平滑肌细胞分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M”，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展，对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平，要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞，由于影响因素单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠结肠平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠结肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

SW038-C2-tk细胞，转染了tk基因的SW038-C2细胞 副溶血性弧菌 人脐静脉平滑肌细胞RNAHUVSMC miRNA5 μg  试剂耗材  人脐静脉平滑肌细胞 人胚肺细胞，NCI-H1563[H1563]细胞 MLTC-1(间质细胞瘤细胞)  CL-0149MCF-7 人原代子宫微血管内皮细胞 猪原代胸腺成纤维细胞

GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDa 糖调节蛋白(抗原)

BLOC1S2 Protein Human 重组人 BLOC1S2 / BLOS2 蛋白 (GST 标签)

IL1R2重组大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 (His 标签) Protein

PGLYRP1 Protein Mouse 重组小鼠 PGLYRP1 / PGRP-S 蛋白 (His 标签)

ANP32A重组人 ANP32A / PHAP1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠谷酰胺(Gln)试剂盒 ，英文名： Gln ELISA Kit

Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猪α干扰素(IFN-α)试剂盒

出血性大肠杆菌(EHEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬细胞性蛋白1α

体液科萨基病毒B(CoxsackievirusB)定性试剂盒20次

ELISAKit2,3-DPG犬2,3-二0酸甘油酸

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸试剂盒   48T

猪乙型脑病毒(JEV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

猪乙型脑病毒(JEV)核酸试剂盒(-PCR法)   48T

小鼠结肠平滑肌原代细胞小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)试剂盒

Humanansferfactor,TFELISAKit 人转移因子(TF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Human25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit人25羟基3

饮料果胶化学比色法定量试剂盒20次

MouseL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit小鼠L苯解氨酶(PAL)试剂盒规格：96T/48T

OPCML重组人 OBCAM / OPCML 蛋白 (His 标签) Protein

微粒体S转移酶1(MGST1)重组蛋白 Recombinant Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1)

KIRREL重组人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 标签) Protein

CADM1 Protein Human 重组人 SynCam / CADM1 / TSLC1 / IGSF4 蛋白 (His 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。