小鼠精原干原代细胞

小鼠精原干原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 球形

传代特性 可传2-3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠精原干细胞分离自睾丸组织；精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞，是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染，异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内，精子发生时一个受高度调控和持续的过程，精原干细胞（SSCs）一方面进行自我更新维持干细胞数量，另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至后生成精子。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处，是哺乳动物精子发生的原始细胞，也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立，在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群细胞，具有自我更新能力和多向分化潜能，是哺乳动物体内能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠精原干细胞采用先机械吹打、后蛋白酶消化，结合Percoll密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠精原干细胞经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

SW-13细胞，肾上腺皮质腺癌细胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma细胞 人肺癌细胞  NSC，大鼠神经干细胞 人脑视神经胶质瘤细胞，Hs 683细胞 RF/6A(猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞)  kasumi-1, 人白血病细胞株 人原代子宫蜕膜基质细胞 人原代颈静脉球瘤细胞

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗原

CD19 Protein Human 重组人 CD19 / Leu-12 蛋白

IFNGR2重组小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Rat 重组大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

BPIFA2重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 标签) Protein

大鼠谷酸脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)试剂盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit

Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)试剂盒

粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M

体液赖(lysine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次

ELISAKitAE禽脑脊髓

心肌钙蛋白 (c)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

CXCL8(CXCL-8)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

结蛋白 (Desmin)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

雌三醇 (E3)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠精原干原代细胞猪血管生成素1(ANG-1)ELISA 试剂盒

Human myogenin (MYOG) ELISA Kit 人肌细胞生成素(MYOG)试剂盒

RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 兔血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒 进口分装

CLIAKitforai-PIVIgM(Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody)ELISAKit人抗副流感病毒IgM抗体

血液5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量试剂盒20次

PorcineImmunoglobulinM,IgMELISAKit猪免疫球蛋白M(IgM)试剂盒

TF重组小鼠 Transferrin / CD176 / Serotransferrin 蛋白  Protein

干扰素诱导内质网关联病毒抑制蛋白(Viperin)重组蛋白 Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)

MAPK12重组人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 (His & GST 标签) Protein

BLMH Protein Human 重组人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 标签)

FCGR2A Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His 标签)