小鼠口腔粘膜成纤维原代细胞

小鼠口腔粘膜成纤维原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠口腔粘膜成纤维细胞分离自口腔粘膜组织；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂与外界相通，后经咽峡与咽相续。口腔内有牙、舌等器官。口腔的前壁为唇、侧壁为颊、顶为腭、口腔底为黏膜和肌等结构。口腔借上、下牙弓分为前外侧部的口腔前庭（oral vestibule）和后内侧部的固有口腔（oral cavity proper）；当上、下颌牙咬合时，口腔前庭与固有口腔之间可借第三磨牙后方的间隙相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠口腔粘膜成纤维细胞采用蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠口腔粘膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

SW1990细胞，人胰腺癌细胞 人胸膜瘤细胞,SMC-1细胞 杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7  小肠粘膜上皮细胞Many   SHG-44细胞，胶质瘤细胞 NCTC克隆929细胞,L129细胞 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系 人原代子宫平滑肌细胞 大鼠原代肠巨噬细胞

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B细胞特异性转录因子抗原

BLNK Protein Human 重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签)

TIMP1重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein

CLEC4F Protein Rat 重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白

ASGR1重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签) Protein

大鼠谷酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)试剂盒 ，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 猪β干扰素(IFN-β/IFNB)试剂盒

侵袭性大肠杆菌(EIEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干扰素诱导单核细胞因子

体液赖(lysine)含量化学比色法定量试剂盒20次

ELISAKitMHC/BoLA牛主要组织相容性复合体

心肌肌钙蛋白1   英文名称：   cardiac oponin 1   规格：      英文缩写：   CTn1

Ⅰ型胶原C端肽   英文名称：   C-telopeptide of type Ⅰ collagen   规格：      英文缩写：   CTX-Ⅰ

   英文名称：   Cytochrome C   规格：      英文缩写：   Cytochrome C

CXC趋化因子受体1   英文名称：   CXC chemokine receptor 1   规格：      英文缩写：   CXCR1

小鼠口腔粘膜成纤维原代细胞小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble cytokine receptor (sCKR) ELISA Kit 人可溶性细胞因子受体(sCKR)试剂盒

HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit 人鸟脱羧酶(ODC)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Mouse25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit小鼠25羟基3

饮料比色法定量试剂盒20次

MouseL-phenylalanine,LPAELISAKit小鼠苯(LPA)试剂盒规格：96T/48T

IL1R2重组小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 Protein

二氢二醇脱氢酶2(DDH2)重组蛋白 Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

KIR2DL4重组人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重组人 CD160 蛋白

ACVR1B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 标签)