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上海恒远生物科技有限公司
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ELISA实验的核心三要素:不可-或缺的三大试剂2025/03/14
一、ELISA基本原理ELISA通过抗原-抗体的特异性结合,利用酶催化底物显色反应进行定量或定性分析。常见的类型包括直接法、夹心法和竞争法,但其核心步骤均依赖于以下三类关键试剂。二、核心试剂一:包被抗体/抗原——实验的“基石”作用:作为固相载体(微孔板)的固定化分子,捕获目标物。纯度与活性:高纯度避免交叉反应,确保结合效率(建议使用单克隆抗体)。包被浓度优化:预实验确定最佳浓度(通常1-10μg/mL),浓度过高易导致空间位阻。缓冲液选择:碳酸盐缓冲液(pH9.6)常用,避免含BSA或Tween
小鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA实验说明2025/03/06
检测范围0.8μmol/L-20μmol/L使用目的本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中同型半胱氨酸(Hcy)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠同型半胱氨酸(Hcy)水平。用纯化的小鼠同型半胱氨酸(Hcy)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入同型半胱氨酸(Hcy),再与HRP标记的同型半胱氨酸(Hcy)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色
ELISA试剂盒样本处理方法2025/02/28
‌一、核心处理流程‌‌1.样本类型与预处理‌‌样本类型‌处理方法(步骤)‌关键注意事项‌血清全血静置30分钟(室温),离心2000×g10分钟(4℃),取上清避免溶血;避免反复冻融(最多3次)‌血浆‌抗凝全血(EDTA/肝素)离心3000×g15分钟(4℃),取上层血浆抗凝剂需与试剂盒兼容(详见说明书)‌细胞上清直接离心1000×g5分钟去除细胞碎片,上清分装保存避免细胞裂解污染(可能干扰检测)‌组织匀浆组织剪碎后液氮研磨,按比例加入PBS(含蛋白酶抑制剂)匀浆,离心12000×g20分钟取上清
抗体及其用途2025/02/19
一、概念抗体,也被称为免疫球蛋白,是一类由浆细胞分泌的大型Y形蛋白质。它们主要存在于脊椎动物的血液、组织液等体液中,以及B细胞的细胞膜表面。抗体的核心功能是特异性识别并结合抗原,即外来病原体(如细菌、病毒)或异常细胞,从而启动一系列的免疫反应以清除这些有害物质。抗体具有高度特异性,即每一种抗体只能识别并结合特定的抗原,这种特性确保了免疫反应的精准性和有效性。此外,抗体还具有多种生物活性,如中和病原体毒素、激活补体系统、标记病原体以便吞噬细胞识别和清除等。二、抗体试剂的多样化用途1.免疫组化实验在
大鼠氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)ELISA实验说明2025/02/10
检测范围:0.2μmol/L-9μmol/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)水平。用纯化的大鼠氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入氧化型辅酶Ⅰ(NAD+),再与HRP标记的氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的
人脂联素(ADP)ELISA实验说明2025/01/20
检测范围80pg/ml-2000pg/ml使用目的本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脂联素(ADP)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂联素(ADP)水平。用纯化的人脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素(ADP),再与HRP标记的脂联素(ADP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂联素(ADP)呈正相
小鼠I型α干扰素(IFN-αI)ELISA实验说明2025/01/15
检测范围1.5pg/ml-50pg/ml使用目的本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中I型α干扰素(IFN-αI)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠I型α干扰素(IFN-αI)水平。用纯化的小鼠I型α干扰素(IFN-αI)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入I型α干扰素(IFN-αI),再与HRP标记的I型α干扰素(IFN-αI)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作
兔免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA实验说明2025/01/09
检测范围5μg/ml-260μg/ml使用目的本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G2(IgG2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中兔免疫球蛋白G2(IgG2)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白G2(IgG2),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G2(IgG2)呈正相关
小鼠脂褐质(Lipofuscin)ELISA实验说明2025/01/03
检测范围0.2ng/ml-10ng/ml使用目的本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中脂褐质(Lipofuscin)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脂褐质(Lipofuscin)水平。用纯化的小鼠脂褐质(Lipofuscin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂褐质(Lipofuscin),再与HRP标记的脂褐质(Lipofuscin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,
牛流行热病毒抗体(EFV-Ab)ELISA实验说明2024/12/26
检测范围5ng/L-160ng/L使用目的本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中流行热病毒抗体(EFV-Ab)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中牛流行热病毒抗体(EFV-Ab)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入流行热病毒抗体(EFV-Ab),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的流行热病毒抗体(EFV-A
病毒中和实验2024/12/19
病毒中和实验是一种重要的免疫学技术,用于评估抗体能否中和病毒的感染性。这种实验不仅具有高度的特异性和敏感性,而且是病毒学研究中不可-或缺的工具。一、实验原理病毒中和实验基于特异性抗病毒抗体(中和抗体)与病毒结合后,使病毒失去吸附和穿入宿主细胞的能力,从而抑制病毒的复制和感染过程。中和抗体与病毒的结合类似于化学中的酸碱中和反应,因此得名。这种中和作用不仅具有严格的种、型特异性,还表现出量的特性,即一定量的病毒必须有相应数量的中和抗体才能被完-全中和。二、实验方法病毒中和实验的方法主要包括简单定性试
斑马鱼丙二醛(MDA)ELISA 实验说明2024/12/12
检测范围0.1nmol/ml-6nmol/ml使用目的本试剂盒用于测定斑马鱼血清、血浆及相关液体样本中丙二醛(MDA)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中斑马鱼丙二醛(MDA)水平。用纯化的斑马鱼丙二醛(MDA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入丙二醛(MDA),再与HRP标记的丙二醛(MDA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的丙二醛
人糖链抗原153(CA153)ELISA 实验说明2024/12/06
检测范围0.5U/ml-18U/ml使用目的本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中糖链抗原153(CA153)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人糖链抗原153(CA153)水平。用纯化的人糖链抗原153(CA153)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入糖链抗原153(CA153),再与HRP标记的糖链抗原153(CA153)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成
影响酶活性的条件及酶在ELISA检测中的步骤2024/11/29
1.温度温度是影响酶活性的关键因素之一。在一定范围内,随着温度升高,酶活性增强,到达最适温度时,酶活性最-强。超过最适温度,酶活性会迅速降低,因为高温会导致酶分子变性,从而失去催化活性。相反,低温会减缓酶促反应速率,但酶分子本身并未变性,温度恢复后酶活性可逐渐恢复。2.pH值pH值对酶活性同样具有显著影响。每种酶都有其最佳pH范围,在此范围内酶活性最-强。pH值的变化可能通过改变酶的电荷状态来影响其三维结构,从而导致酶活性降低甚至失活。因此,在进行酶促反应时,需要精确调节反应体系的pH值,以确保
小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal) ELISA 实验说明2024/11/21
检测范围:3IU/L-150IU/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中β-半乳糖苷酶(β-gal)活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal)水平。用纯化的小鼠β-半乳糖苷酶(β-gal)体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β-半乳糖苷酶(β-gal),再与HRP标记的β-半乳糖苷酶(β-gal)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
噬菌体技术的定义、应用及ELISA检测方法2024/11/14
‌一、噬菌体的定义‌噬菌体(Phage),又称为细菌病毒,是专门感染细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的病毒总称。噬菌体具有严格的宿主特异性,这意味着它们只能感染特定的微生物种类。噬菌体由核酸和蛋白质组成,体积微小但结构复杂,是病毒中最为普遍和分布最-广的群体之一。它们通常在一些充满细菌群落的地方,如泥土、动物的肠道等,被发现和存在‌。二、噬菌体的应用‌1.‌细菌鉴定与分型‌:噬菌体具有高度的种、型特异性,即一种噬菌体只能裂解和它相应的某种细菌的某一型。因此,噬菌体被广泛用于细菌的鉴定和分
花青素的定义、应用及ELISA检测方法2024/11/08
一、花青素的定义花青素(Anthocyanin),又称花色素,是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,属于生物类黄酮物质。它是花色苷水解后得到的有颜色的苷元,决定了许多植物花朵、果实、叶片和种子的颜色变化,使这些植物能够展现出从红色、紫色到蓝色的丰富色泽。花青素的基本结构为3,5,7-羟基-2-苯基苯并吡喃,其结构中R1和R2碳位上的取代基不同,形成了多种不同的花青素种类,包括天竺葵色素、矢车菊色素、飞燕草色素等‌。二、花青素的应用1.食品着色花青素因其鲜艳的色彩和稳定性,被广泛应用于食品工业中
AAV的定义、方法及应用2024/10/30
一、AAV的定义‍AAV是一种单链DNA缺陷型病毒,属于微小病毒科。其基因组DNA小于5kb,无包膜,外形为裸露的二十面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒等)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染。AAV的基因组两端为末端反向重复序列(ITR),中间基因组编码两个主要蛋白:Cap(衣壳蛋白)和Rep(复制白)。ITR对于病毒的复制和包装具有决定性作用。二、AAV的生产方法AAV的生产工艺通常涉及多个步骤,包括质粒构建、细胞培养、病毒包装、收集和纯化等。以下是AAV生产
蛋白质纯化的定义、方法及操作步骤2024/10/23
一、蛋白质纯化的定义蛋白质纯化是指利用蛋白质之间的相似性和差异性,通过一系列物理化学手段,从复杂的生物样品中分离出目标蛋白质的过程。这一过程要求去除大部分杂质,同时保持蛋白质的天然活性和结构完整性。二、蛋白质纯化的方法蛋白质纯化方法多种多样,通常根据蛋白质的物理化学性质(如分子量、电荷、疏水性和特异性结合能力等)来选择合适的方法。以下是一些常用的蛋白质纯化方法:‌盐析法‌:通过在蛋白质溶液中加入高浓度的盐(如硫酸铵),使蛋白质因溶解度降低而沉淀析出。这种方法简单有效,但需注意盐浓度和pH值的控制
人E3泛素连接酶(DTX3L) ELISA实验说明2024/10/14
检测范围:4pg/ml-220pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中E3泛素连接酶(DTX3L)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人E3泛素连接酶(DTX3L)水平。用纯化的人E3泛素连接酶(DTX3L)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入E3泛素连接酶(DTX3L),再与HRP标记的E3泛素连接酶(DTX3L)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过充分洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转
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