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H₂S 含量测定试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

H2S 含量测定试剂盒 信号系列

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

H2S 是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的H2S 对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。

测定原理：

H2S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成ya甲基蓝，ya甲基蓝在 665nm 处有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算 H2S 含量。

组成：

试剂三：液体 16ml×1 瓶，4℃避光保存。试剂五：液体 2.5ml×1 瓶，4℃避光保存。

自备仪器和用品：

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、蒸馏水。

样品处理:

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1ml 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g， 4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

血清（浆）：直接测定

操作表（取 2 ml 离心管，按照下表操作）:

H2S 计算公式:

标准曲线回归方程为：y = 0.0044x，R2 = 0.9988

组织样品

a.按照蛋白浓度计算

H2S（nmol/mg prot）= b.按照样本重量计算 H2S（nmol/g 鲜重）=

ΔA ×V 反总÷（V 样×Cpr）=340.9×ΔA÷Cpr

0.0044 

ΔA ×V 反总÷（V 样÷V 样总×W）= 340.9×ΔA÷W

液体样品

H2S（nmol/ml）=

(3) 细胞

0.0044 

ΔA ×V 反总÷V 样= 340.9×ΔA

0.0044

H2S（nmol/104 cell）=

ΔA ×V 反总÷（V 样÷V 样总×细胞数量(万个)）=340.9×ΔA÷细胞数量（万个）

0.0044

V 反总：反应总体积，0.9ml；V 样：反应中样品体积，0.6ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/ml

注意事项:

最di检出限为 1nmol/ml。

H2S 含量测定试剂盒 信号系列