支原体染色检测试剂盒100T 返回列表页

支原体染色检测试剂盒

产品货号：R23155

产品规格：100ml

产品简介： 支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一种经典的利用DNA荧光染色法检测支原体污染的试 剂盒，其原理是当细胞发生凋亡时，染色质会固缩， Hoechst染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈 正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。 尚宝生物 Hoechst Staining Kit经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测 细胞含量范围一般为0.1～1×10 6之间。

产品组成： 自备材料： 1. 可观察蓝光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜 2. PBS或生理盐水 3. 载玻片、盖玻片 4. 预冷固定液：预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛 操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1. 取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS或生理盐水洗涤3次， 再用细胞培养液洗涤1次。将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内，接种细胞培养过夜，使融合率约为50%～ 80%。 2. 加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst固定液0.5ml，固定10分钟或更长时间(可4℃过 夜)。 3. 去除固定液，用PBS或生理盐水洗2次，每次3min，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4. 加入Hoechst染色液0.5ml，孵育5min。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5. 弃染色液，PBS或生理盐水洗2次，每次3min，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 6. 滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，避免气泡。 7. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm左右，发射波长460nm左右。 (二)悬浮细胞 1. 离心收集细胞样品于1.5ml离心管内并弃液，加入Hoechst固定液0.5ml，缓缓悬起细胞，固定10min或更长时 间(亦可4℃过夜)。 2. 低速离心去除固定液，用PBS或生理盐水洗2次，每次3min。洗涤时手动晃动数次。