产品说明:
汇智泰康公司的沙门氏菌LAMP检测试剂盒,采用环介导等温扩增结合钙黄绿素显色技术,适用于食品及环境中沙门氏菌的快速检测。
本产品具有以下特点:
- 简单快速,只需在反应管中加入待测DNA模版,60-65℃恒温反应60min即可肉眼观察结果,不需要特殊仪器。
- 可用于检测食品样本前增菌液或细菌纯培养物(如:菌落)。
- 不含有任何有毒的试剂。
产品组成(24次/包装)
组成(24个反应) | 数量(管) | 规格 |
DNA提取液A | 2 | 1.5mL/管 |
DNA提取液B | 1 | 0.6 mL/管 |
LAMP反应管 | 24 | 23 μL反应液+30 μL保护液/管 |
阳性对照 | 1 | 50 μL/管 |
运输及保存条件
干冰运输。-20oC条件下保存6个月。避免反复冻融。
使用说明
- 模板制备
食品样本前增菌液:吸取标准方法培养的食品样本前增菌液200 μL加入1.5 mL离心管中,10 000 r/min离心2 min,弃上清。加入100
- B,混匀后离心,上清液即为DNA模板。制备的DNA样品-20oC可长期保存。
- 纯细菌培养物:对于标准方法分离到的疑似菌落,可直接挑取疑似菌落,按a中步骤,加入DNA提取液A和B制备DNA模板
- LAMP检测
- 取出n个LAMP反应管(n=待测样本数+阳性对照+阴性对照)于冰上融化并短暂离心;
- 向上述反应管加入阴性对照、待测样品或阳性对照DNA样本各2 μL。
注意:加样时枪头要穿过保护层加至反应液层,盖紧管盖并做好标记。由于LAMP反应非常灵敏,建议使用带滤芯的枪头,并在生物安全柜中操作,避免可能出现的污染。
- 64oC恒温反应60 min。
- 80oC加热10 min终止反应。
结果判断
- 肉眼或紫外灯下观察:阴性对照管,橙色澄清;阳性对照,绿色浑浊。
- 若待测样品管中液体呈橙色澄清,则可初步判断待测样品中不含沙门氏菌;若待测样品管中液体呈绿色浑浊,则可初步判断待测样品中含沙门氏菌;
图注 1:阴性对照
2:阳性对照
注意事项
- 实验开始前对工作台进行紫外照射,并使用1%次氯酸钠或75%酒精清理工作台面。需定期按上述要求对各实验区域进行清理。
- 实验室严格分区,各区物品,严禁交叉使用。
a. 待测样品模板制备区
b. 反应体系配制区
c. 反应区及结果观察区(建议在通风橱中进行)
- 结果观察时应该小心谨慎,避免剧烈震荡,反应物外溢。
- 结果分析完成后反应管应密封于容器内,丢弃于地点;实验过程中的废弃物及一次性耗材均需*灭菌后方能丢弃。