细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE) 返回列表页

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产品详细介绍：

DNA提取流程图：

实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔白介素-1RA(rabbit IL-1ra)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬-4-苄酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%

兔白介素-1a(rabbit IL-1a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate  7536-58-5  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-天冬-4-苄酯  分子式：C16H21NO6  度：98.0%   

兔白介素-18(rabbit IL-18)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Benzyl L-aspartate  2177-63-1  中文名：L-天冬-4-苄酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%   

兔白介素17elisa试剂盒   兔白介素17试剂盒   规格型号：96T/48T   兔白介素17试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔白介素17试剂盒、兔白介素17 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  4-Biphenylcarboxylic acid  92-92-2  中文名：4-苯甲酸  分子式：C13H10O2 

兔白介素17(IL-17)ELISA试剂盒     4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  3479-47-8  中文名：N-苄氧羰基-L-天冬-4-苄脂  分子式：C19H19NO6
蛋白酶K(进分)  Proteinase K  质量规格：≥30units/mg protein,sigma分装 Ratplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

蛋白酶K(Sigma)  Proteinase K  质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装 GST(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

胰凝乳蛋白酶抑制剂  Chymostatin  质量规格：进分 Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISA试剂盒小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

亮抑蛋白酶肽(进口)  Leupeptin   质量规格：≥95%,进口半硫酸盐 小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒 ，英文名： ACA-IgA ELISA Kit

胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制剂  Pepstatin A microbial  质量规格：≥90%,进分 大鼠C(VC)ELISA检测试剂盒RatVitaminC,VCELISAKit 96T/48T

岩藻糖；L-岩藻糖  L-(-)-Fucose   质量规格：≥99%,BR 人蛋-R-亚砜还原酶 B2,线粒体(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)试剂盒 Human MSRB2 ELISA kit

果胶酶  Pectinase  质量规格：3万U/g Ratplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

β-(70万u/ml液体)  beta-Amylase  质量规格：BR,70万u/ml液体 GST钓饵(PULLDOWN)检测试剂盒2/5

β-(酶活5万粉末)  beta-Amylase  质量规格：BR,酶活5万,粉末 Mousethrombospondin1,TSP-1ELISA试剂盒小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DNA酶,脱氧核糖核酸酶Ⅰ  Deoxyribonuclease  质量规格：≥2000KU/mg protein,(牛胰) 小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 ，英文名： AMA ELISA Kit
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