Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针 Fluo-4, AM 返回列表页

产品详细介绍：

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DNA提取流程图：

实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
兔固（ALD）ELISA试剂盒     5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%

兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4  度：%  关键词：  红根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体elisa试剂盒   兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体试剂盒、兔骨退化特异性标志物CTX-2抗体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%  关键词：  千里光; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%  关键词： 

兔骨碱性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2
内消旋-2,3-二巯基丁二酸(>98.0%(T))  meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid  质量规格：>98.0%(T) 英文名称RatAdiponectinELISAKit大鼠脂联素(ADT)规格：96T/48T

吡哆醛-L-谷二钾盐[药物研究配体]  Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt  质量规格：药物研究配体 肝脂酶活性比色法定量检测试剂盒20

吡哆醛-L-异亮钾盐[药物研究配体]  Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt  质量规格：药物研究配体 ELISAKitFFA人游离脂肪酸规格：48T/96T

1,4,7,10-四氮杂环十二烷四盐酸盐(>98.0%(N))  1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetra  质量规格：>98.0%(N) 小鼠颗粒酶M(GZMM)ELISA试剂盒 ，英文名： GZMM ELISA Kit

己二酸双(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))  Bis(2-ethylhexyl) Adipate  质量规格：>98.0%(GC) 人促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA检测试剂盒Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 96T/48T

3,4-苯并芘(升华精制品)(>95.0%(GC))  3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)  质量规格：>95.0%(GC) 大鼠血栓调节蛋白(TM)试剂盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit

双(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC))  Bis(phenylacetyl) Disulfide  质量规格：>98.0%(HPLC) 英文名称RatadiponectinELISAKit大鼠脂联素(adiponectin)ELISAKit规格：96T/48T

苯并红紫4B[pH指示剂]  Benzopurpurine 4B  质量规格：pH指示剂 高多糖/酚植物线粒体DNA萃取试剂盒10/20

五甲氧基红(>98.0%(HPLC))  Pentamethoxy Red  质量规格：>98.0%(HPLC) ELISAKitFEP人游离原卟啉规格：48T/96T

苯甲基橙(>95.0%(W))  Benzyl Orange  质量规格：>95.0%(W) 小鼠颗粒酶K(GZMK)ELISA试剂盒 ，英文名： GZMK ELISA Kit
Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针 Fluo-4, AM组织CASEIN KINASE 2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。