Denhardt溶液(同位素探针) 返回列表页

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产品详细介绍：

DNA提取流程图：

图

实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒     5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-79-9  中文名：5-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S 

兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISAKit     5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine  中文名：  分子式：C16H14ClNO  度：98.0%

兔内皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Amino-2-methylindole  7570-49-2  中文名：5-氨基-2-甲基吲哚  分子式：C9H10N2  度：98.0%  关键词： 

兔内皮型合成酶elisa试剂盒   兔内皮型合成酶试剂盒   规格型号：96T/48T   兔内皮型合成酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔内皮型合成酶试剂盒、兔内皮型合成酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Amino-1-naphthol  83-55-6  中文名：5-氨基-1-萘酚  分子式：C10H9NO  度：98.0%  关键词： 

兔内皮型合成酶(eNOS)ELISA试剂盒     5-Amino-2-methylindole  中文名：5-氨基-2-甲基吲哚  分子式：C9H10N2  度：98.0%
二十烷(>99.5%(GC),标准物)  Eicosane  质量规格：>99.5%(GC),标准物质 RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二十一烷(>99.0%(GC)，标准物质)  Heneicosane  质量规格：>99.0%(GC)，标准物质 G418溶液10毫克/毫升

二十二烷(>99.0%(GC)，标准物质)  Docosane   质量规格：>99.0%(GC)，标准物质 Mousesolubleclusterofdiffereiation30,sCD30ELISA试剂盒小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二十三烷(>99.0%(GC)，标准物质)  Tricosane  质量规格：>99.0%(GC)，标准物质 小鼠可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)ELISA试剂盒 ，英文名： sLOX-1 ELISA Kit

二十四烷(>99.0%(GC)，标准物质)  Tetracosane  质量规格：>99.0%(GC)，标准物质 大鼠17羟皮质类(17-OHCS)ELISA检测试剂盒Rat17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 96T/48T

二十五烷(>99.0%(GC)，标准物质)  Pentacosane  质量规格：>99.0%(GC)，标准物质 人蛋白酶体(prosome,macropain)亚基,β型,2(PSMB2)试剂盒 Human PSMB2 ELISA kit

正辛酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)  Methyl n-Octanoate  质量规格：>99.5%(GC),标准物质 RatOsteoprotegerin,OPGELISAKit大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

壬酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)  Methyl Nonanoate   质量规格：>99.5%(GC),标准物质 Gamborg’sB5基础培养基500毫升溶液/片剂

甲酯(>99.5%(GC),标准物质)  Methyl Laurate   质量规格：>99.5%(GC),标准物质 MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA试剂盒小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒规格：96T/48T

肉豆蔻酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)  Methyl Myristate  质量规格：>99.5%(GC),标准物质 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒 ，英文名： sMHC-2 ELISA Kit
Denhardt溶液(同位素探针)细胞P38β2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织NLK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞NLK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织NEK6激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞NEK6激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）