超级杂交液(Oligo探针) 返回列表页

DNA提取流程图：

下列是产品的订购信息!产品仅用于科研

产品详细介绍：

操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔色素上皮衍生因子elisa试剂盒   兔色素上皮衍生因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔色素上皮衍生因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔色素上皮衍生因子试剂盒、兔色素上皮衍生因子 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%  关键词： 

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒     5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit     5-Azacytidine  320-67-2  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  关键词： 

兔软骨糖蛋白39(rabbit YKL-40)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4 

兔软骨寡聚基质蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Hydroxythiobenzamide  中文名：  分子式：  度：98.0%
三环唑标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  质量规格：10μg/ml,u=2% RatomeinELISAKit大鼠网膜素(omein)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氟乐灵标准溶液(100μg/ml,u=3%)  Trifluralin solution  质量规格：100μg/ml,u=3% FITC蛋白标记试剂盒3(200微克/)

草达津(标准品)  Trietazine  质量规格：分析标准品 Mousesexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA试剂盒小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

阿克泰(分析标准品,98%)  Thiamethoxam  质量规格：分析标准品,98% 小鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA 试剂盒

三唑酮(分析标准品，99.8%)  Triadimefon  质量规格：分析标准品，99.8% Rat macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒

无水硫酸钠(分析标准品,pestizides≤1 ppm)   sulfate anhydrous  质量规格：分析标准品,pestizides≤1 ppm HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高铁血红蛋白(MHB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

甲嘧磺隆(标准品)  Sulfometuron-methyl  质量规格：分析标准品 Humanadrenomedullin,ADMELISA试剂盒人肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

西草净(分析标准品,97%)  Simetryne  质量规格：分析标准品,97% 植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20(10样本)

喹禾灵(分析标准品,96%)  Quizalofop-ethyl  质量规格：分析标准品,96% MouseactivatedproteinC,APCELISAKit小鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

精喹禾灵(分析标准品，98%)  Quizalofop-p-ethyl  质量规格：分析标准品，98% 小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 ，英文名： sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
超级杂交液(Oligo探针)细胞PKCε激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织PKCδ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞PKCδ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

组织PKCγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞PKCγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)