Mouse Galectin-3 ELISA Kit
一、产品概述
二、试剂盒组成
预包被板:常见为 96 孔或 48 孔板,其表面已牢固固定捕获抗体,是结合样本中 Galectin-3 的关键载体。
标准品:一系列已知精确浓度的 Galectin-3 蛋白溶液,用于绘制标准曲线,为样本定量提供参照。
检测抗体:经生wu素标记,能高度特异性地识别并结合 Galectin-3,在夹心结构的形成中起重要作用。
酶结合物:如辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,用于催化底物显色,放大检测信号。
底物溶液:以 TMB 溶液居多,在酶作用下从无色转变为蓝色,通过颜色变化指示反应进程和结果。
终止液:一般为硫酸溶液,加入后可终止显色反应,使颜色稳定,便于酶标仪准确读数。
洗涤缓冲液:用于多次洗涤酶标板,去除未结合的各种物质,降低非特异性信号干扰,保证检测结果的准确性。
稀释液:用于将样本、标准品以及检测抗体等稀释至合适的工作浓度,确保实验体系的有效性。
三、样本类型
血清:采集小鼠血液后,经自然凝固和离心处理得到的上清液。血清样本获取相对简便,且能反映机体整体的 Galectin-3 水平,是常用样本之一。
血浆:使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐等抗凝剂采集血液,随后离心获得的上清液。需注意不同抗凝剂可能对检测结果产生一定影响,应严格依照试剂盒要求选择。
细胞培养上清:培养小鼠细胞后收集的培养液,可用于检测细胞分泌到培养基中的 Galectin-3,有助于研究细胞层面的 Galectin-3 表达和释放机制。
组织匀浆:将小鼠组织经研磨破碎处理,制成匀浆后离心取上清。通过检测组织匀浆中的 Galectin-3 含量,能了解该蛋白在特定组织中的分布和表达情况。
四、性能指标
灵敏度:指试剂盒能够可靠检测到的zui低 Galectin-3 浓度。不同品牌产品灵敏度有差异,如 Abcam 的 Mouse Galectin-3 试剂盒(ab203369)灵敏度可达 2.4 pg/ml,Invitrogen 的试剂盒灵敏度为 6 pg/ml ,Novus Biologicals 的 Mouse Galectin-3 试剂盒 (Chemiluminescence)(货号 NBP2 - 67972)灵敏度为 7.50 pg/ml。
检测范围:即试剂盒能够准确测量 Galectin-3 浓度的区间。例如,Abcam 的试剂盒检测范围为 7.81 pg/ml - 500 pg/ml,Invitrogen 的为 8.19 - 2000 pg/ml,Novus Biologicals 的标准曲线范围是 12.50 - 800 pg/ml。
精密度:包括板内精密度和板间精密度,常用变异系数(CV%)衡量。以 Abcam 试剂盒为例,板内 CV% 为 3.7%,板间 CV% 为 8.9% 。Novus Biologicals 的板内变异系数 CV% < 9.26%,板间变异系数 CV% < 10.14%,Sigma - Aldrich 的板内变异系数 CV < 10%,板间变异系数 CV < 12%。精密度越高,说明实验结果的重复性和可靠性越好。
特异性:优质试剂盒应只对小鼠 Galectin-3 产生特异性反应,与其他类似蛋白或物质不发生交叉反应,从而保证检测结果真实反映样本中 Galectin-3 的含量。