Mouse Flt-3L ELISA Kit

Mouse Flt-3L ELISA Kit即小鼠 Fms 样酪an酸激酶 3 配体（Flt-3L）酶联免疫吸附测定试剂盒。

检测原理

• 包被：将针对小鼠 Flt-3L 的特异性捕获抗体预包被在酶标板的孔壁上，形成固相抗体。

• 抗原抗体结合：加入待检测的小鼠样本，样本中的 Flt-3L 会与固相化的捕获抗体特异性结合。

• 形成夹心结构：再加入生wu素标记的检测抗体，它能够与已结合在捕获抗体上的 Flt-3L 特异性结合，从而形成 “捕获抗体 - Flt-3L - 生wu素化检测抗体" 的夹心复合物。

• 酶结合：随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，链霉亲和素与生wu素具有高度亲和力，会特异性结合到生wu素化的检测抗体上。

• 显色与检测：加入底物溶液，如四甲基联苯胺（TMB），在 HRP 的催化作用下，TMB 发生显色反应，颜色由无色变为蓝色，颜色的深浅与样本中 Flt-3L 的浓度成正比。最后加入终止液终止反应，使用酶标仪在特定波长下测定吸光度值，通过与标准曲线对比，计算出样本中 Flt-3L 的含量。

试剂盒组成

• 预包被板：一般为 96 孔或 48 孔聚苯乙烯板，表面已包被好捕获抗体，为 Flt-3L 的结合提供固相载体。

• 标准品：一系列已知浓度的 Flt-3L 蛋白标准溶液，用于绘制标准曲线，通常浓度范围覆盖了试剂盒的检测范围。

• 检测抗体：生wu素标记的特异性抗体，可与 Flt-3L 特异性结合，用于检测已与捕获抗体结合的 Flt-3L。

• 酶结合物：通常是 HRP 标记的链霉亲和素，用于与生wu素化的检测抗体结合，催化底物显色反应。

• 底物溶液：常用 TMB 溶液，在 HRP 的作用下发生显色反应，产生可检测的信号。

• 终止液：如硫酸溶液，用于终止显色反应，使颜色稳定以便于酶标仪读数。

• 洗涤缓冲液：用于洗涤酶标板，去除未结合的物质，减少非特异性信号。

• 稀释液：用于稀释样本、标准品和检测抗体等，使其达到合适的工作浓度。

适用样本类型

• 血清：采集小鼠血液后自然凝固，离心后得到的上清液，可反映小鼠体内循环系统中 Flt-3L 的水平。

• 血浆：使用抗凝剂采集小鼠血液，离心后获得的上清液。不同抗凝剂可能对检测结果有影响，需按试剂盒要求选择。

• 细胞培养上清：培养小鼠细胞后收集的培养液，可用于检测细胞分泌到细胞外的 Flt-3L。

• 组织匀浆：将小鼠组织经过研磨等处理制成匀浆，离心后的上清液，可用于检测组织中 Flt-3L 的表达情况。

性能指标

• 灵敏度：一般可达到较低的检测限，如某些试剂盒的灵敏度可达几 pg/ml，能够检测到样本中极低浓度的 Flt-3L。

• 检测范围：通常有一个较宽的检测区间，例如 10 - 1000 pg/ml，以满足不同样本中 Flt-3L 含量的检测需求。

• 精密度：包括板内精密度和板间精密度，以变异系数（CV%）表示。优质的试剂盒板内 CV% 通常小于 10%，板间 CV% 小于 15%，保证实验结果的重复性和稳定性。

• 特异性：试剂盒中的抗体对小鼠 Flt-3L 具有高度特异性，与其他类似蛋白或物质的交叉反应极低，确保检测结果准确反映 Flt-3L 的含量。

应用领域

• 血液学研究：在研究小鼠造血系统疾病如白血病、再生障碍性贫血等时，通过检测 Flt-3L 的水平，可了解造血微环境的变化以及造血干细胞的增殖分化状态，为疾病的诊断和治疗提供依据。

• 免疫学研究：在研究免疫细胞的发育和免疫反应的调节时，Flt-3L 与树突状细胞等免疫细胞的发育和功能密切相关。使用该试剂盒检测 Flt-3L 含量，有助于深入了解免疫调节机制以及免疫相关疾病的发病机制。

• 肿瘤研究：在小鼠肿瘤模型中，Flt-3L 的表达与肿瘤的生长、转移和免疫逃逸等过程有关。检测肿瘤组织或血清中的 Flt-3L 水平，可为肿瘤的治疗和预后评估提供参考。