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CLO01-20KUNobleRyder DNA连接酶

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  • 北京诺博莱德科技有限公司
  • 2024-11-21 08:46:00
  • 北京市
  • 822

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【简单介绍】

品牌 其他品牌 货号 CLO01-20KU / CLO01-80KU
规格 20KU/80KU 供货周期 一周
应用领域 化工,生物产业
NobleRyder DNA连接酶
NobleRyder CLO01-20KU DNA连接酶 T4 DNA ligase(Rapid) 20KU
NobleRyder CLO01-80KU DNA连接酶 T4 DNA ligase(Rapid) 80KU

【详细说明】

NobleRyder  CLO01-20KU  DNA连接酶  T4 DNA ligaseRapid  20KU

 

产品品牌:NobleRyder

产品货号:CLO01-20KU

产品名称:DNA连接酶

英文名称:T4 DNA ligaseRapid

产品规格:20KU

 NobleRyder  DNA连接酶

产品内容:

组分

CLO01-20KU

CLO01-80KU

T4   DNA Ligase (400U/μL)

50   μL

200   μL

10   x T4 DNA Ligase Buffer

100   μL

0.5   mL

5   x Rapid Ligase Buffer

200   μL

1   mL

 

产品简介

T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA连接酶基因的大肠杆菌中纯化而来,可催化双链DNARNA上的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化粘性末端或平末端之间的连接,还可以修复双链DNARNADNA/RNA 杂交双链中的单链切口。

 

活性定义

20μL的连接反应体系中,6μg的λDNA-HindⅢ分解物在16℃下反应30 min时,催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)

 

注意事项

1. 请于使用前确保产品wan全解冻,che底混匀后短暂离心,置于冰上备用。

2. T4 DNA Ligase 不稳定,使用时冰上操作,用完立即放回-20℃。

3. 反复冻融会影响产品的性能。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

实验方法

1.DNA片段与载体连接(粘性末端连接)

①冰上配制连接反应体系:

试剂

体积

线性化载体DNA

20~100   ng

插入片段DNA

3:1~10:1(片段:载体摩尔比)

10   x T4 DNA Ligase Buffer

1   μL

T4   DNA Ligase (400U/μL)

1   μL

DNase-Free   Water

Up   to 10 μL

②反应条件:

25 ℃反应10 min

2.DNA片段与载体连接(平末端连接)

①冰上配制连接反应体系:

试剂

体积

线性化载体DNA

20~100   ng

插入片段DNA

1:1~5:1(片段:载体摩尔比)

5   x Rapid Ligase Buffer

2   μL

T4   DNA Ligase (400U/μL)

2   μL

DNase-Free   Water

Up   to 10 μL

* 平末端载体与片段进行连接时,应首先将载体进行去磷酸化处理,防止其自身环化。

②反应条件:

25 ℃反应1 h16 ℃过夜。

3. DNA 文库构建中接头连接反应

①冰上配制连接反应体系:T4 DNA Ligase (400U/μL)

试剂

体积

dA-tailed   DNA

10   μL

DNA   Adapter

1:10~1:20dA-tailed   DNA : DNA       Adapter 摩尔比)

5   x Rapid Ligase Buffer

4   μL

T4   DNA Ligase(400U/μl)

2   μL

DNase-Free   Water

Up   to 20 μL

②反应条件:

25 ℃反应10 min

如需失活T4 DNA Ligase 65℃反应10 min 或者 70℃反应 5 min

 

产品订购信息:

NobleRyder  CLO01-20KU  DNA连接酶  T4 DNA ligaseRapid  20KU

NobleRyder  CLO01-80KU  DNA连接酶  T4 DNA ligaseRapid  80KU

 NobleRyder  DNA连接酶


    
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