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28

2013年
08月

*--上海不锈钢试管帽

上海宝叶生物科技有限公司为开学庆祝及为感谢新老客户长期对我公司的支持,我司特举行*活动,本公司不锈钢试管帽长期销售,各种规格:13#15#18#,欢迎新老客户!!新的一学期又开始了希望所有同学们在新的学期里努力学习,为自己的梦想加油吧!
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23

2013年
04月

自身抗体-抗细胞因子抗体

1.致病作用抗细胞因子抗体的致病性尚未清楚,然而上述自身抗体的Fab片段具有特异性低、高亲和力结合相应细胞因子的能力。实际上,在正常人血清中抗IL-la,IL-6的自身抗体是其惟一且重要的结合蛋白。虽然目前对血清中的IgG能够进行分类检测,但IFNα、IL10的自身抗体却无法检测到。可能的原因是自身抗体与其相应的细胞因子以免疫复合物的形成存在于血清中,或者是血清中存在某种抑制因子。欲将复合物中的抗原、抗体分开,因抗体的高亲和力而不易达到目的。至今仍未明白针对这些细胞因子的高亲和力的自身抗体为什么
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16

2013年
03月

利用血清筛选噬菌体文库交叉抑制实验

[器材和试剂]●多孔板(ImmunoplateMaxisorp,Nuno)●TBS●PEG—纯化噬菌体●PBST●封闭液(含5%脱脂牛奶,0.05%Tween—20,0.02%NaN3的PBS)●XLl—Blue细菌提取物●碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG(Fc特异性)抗体(Sigma)●底物缓冲液(10%二乙醇胺,0.5mmmol/LMg-2,0.05%NaN3,用HCl调节至pH9.8)●显色液(在底物缓冲液中加1mg/mlp硝基苯磷酸)●自动酶标仪[方法]1.将100ul含有2×1010个PE
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16

2013年
03月

利用血清筛选噬菌体文库PCR扩增的模板

[方法]1.用无菌塑料吸嘴挑取一个AmpR噬菌粒菌落(直径大约lmm)并将其转入到0.2mlMicroAmp反应管中,内含20u1洗脱缓冲液。在GeneAmp9600PCR仪中,95℃加热样本10分钟(避免用离心澄清,因为加热可使细胞碎片黏附在管底)。2.将菌落提取物作为该克隆的主拷贝保存。另外,这些菌落也可以直接转移到PCR反应体系中,并在PCR程序中插入加热步骤。此时,可将克隆主拷贝穿刺接种到在用UV灭菌并铺有LB—琼脂培养基+Amp的微板孔中。3.配置PCR反应体系:将3ul菌落提取物加入
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14

2013年
03月

噬菌体展示文库T7活体筛选的特殊步骤

CAS号:3844-53-9中文名称:L-赖氨酸乙酯二盐酸盐其他中文名称:英文名称:H-Lys-OEt•2HCl其他英文名称:L-Lysineethylesterdihydrochloride产品规格:特纯英文名称:H-Lys-OEt·2HCl;L-LysineethylesterdihydrochlorideCAS号:3844-53-9C8H18N2O2·2HC1=247.17的别:Purum含量:≥98.0%熔点:145℃比旋光度:+10±1°(c=2%inH2O)性状:白色或类白色结晶粉末
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14

2013年
03月

噬菌体展示文库体外筛选的通用步骤

1.通过腹腔注射浓度为1.25%(w/v)的阿佛丁来麻醉小鼠。2.打开胸腔并暴露心脏。3.用10ml的DMEM或PBS来灌注小鼠。4.连同一个或多个对照器官一起,取出要研究的器官和组织,并将其置于一个直径为30m的细胞培养皿中。5.用无菌刀片将每个器官或组织都切碎。6.将切碎的器官或组织放到2.2m1的无菌塑料管中,并加入1.8m10.5mg/m1的胶原酶。混匀并在37℃摇瓶孵育30分钟。在37℃培养时,持续摇动样品。7.以1500r/min的速率短暂离心细胞悬液5分钟,并弃去上清。8.将每份用
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12

2013年
03月

pG6质粒简介,pG6质粒说明

pG6质粒是噬菌体颗粒载体,是为融合蛋白的单价展示设计的。来自辅助噬菌体的野生型pⅥ与噬菌体颗粒载体表达的pⅥ-cDNA的融合蛋白竞争合成原始的噬菌体颗粒。在多链接区域除了有一个额外的SalI位点以外,实际上噬菌体颗粒载体pG6A、pG6B、pG6C与载体pDONG6是等同的,pDONG6允许在gⅥ的3’末端进行eDNA文库克隆。从lac启动子转录可以产生双侧顺反子mRNA:*条顺反子在lacZ和gⅢ3’末端之间编码一个融合蛋白,而第二条顺反子包含了gⅥ-eDNA融合基因。gⅥ的核糖体结合位点控
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12

2013年
03月

从预制的入GTll文库中制备cDNA插入片段

[方法]A.PCR扩增cDNA插入片段1.在冰浴中将以下成分加到0.2m1微量离心管中(执行10步反应)●水,36.5ul●10×Pfu缓冲液,5.0ul●10mmol/LdNTP,1.5ul●λGTll正向引物(10umol/L),2.5ul●λGTll反向引物(10umol/L),2.5ul●已制备好的Sfi-NotIλGTllcDNA文库,1.Oul●PfuDNA聚合酶(2.5U/ul),1.0ul2.混合反应物并用50ul的矿物油覆盖。3.在95℃下使模板变性2分钟,按如下操作执行25次
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