超实用干货（一) | 如何选择合适的C18色谱柱？

《中国药典》中涉及使用液相色谱法进行检测的品种，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱应用最为广泛。

十八烷基硅烷（常被称为ODS 或C18）是最早的键合固定相之一，C18是具有烷基链的硅烷化剂与硅胶表面的硅醇基反应制得的键合相。因为使用了共价键和的方式将烷基链紧紧固定在硅胶表面，所以烷基链不会被流动相冲洗掉，作为色谱固定相稳定发挥作用。

然而多数情况《中国药典》仅指明色谱柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，却没有明确的规格信息。C18色谱柱因键合方式、粒径、长度、内径等诸多因素呈现出不同选择性。目前市场上的C18色谱柱种类众多，而《中国药典》又缺少选柱详细指导，使得色谱分析工作者执行药典推荐方法选择合适色谱柱的时候，会感到非常困惑。

本文将以2020版《中国药典》中肉苁蓉的含量测定为例，从色谱柱的碳载量、柱长和填料基质三个维度阐述如何选择一支合适的液相色谱柱。

如图所示，2020版《中国药典》中肉苁蓉的含量测定中，色谱条件与系统适用性试验，仅有色谱柱填料类型，无具体规格。我们选择了4种C18色谱柱（见表）对肉苁蓉的对照品分别进行了分析测试。

①药典里注明“以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂”且没有特别指明规格明细的情况下，色谱柱的规格我们一般就选HPLC上常用的规格：柱长250 mm，内径4.6 mm，粒径5 μm。流动相pH在色谱柱pH使用范围内的前提下，选在中药饮片分析中通用性强的全多孔型色谱柱1，碳载量为15%。 

不同C18色谱柱之间的保留行为差别很大，选择合适的C18色谱柱是药物分析工作的重点。目前使用《中国药典》未能对各品种项下的C18色谱柱进行品牌和规格方面的规定。所以在药物分析工作中，要注意到C18色谱柱之间的差异，并挑选合适的C18色谱柱来开展实验分析。

相关产品信息：