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预制菜、肉制品中糖检测之前处理方法

检测样品:预制菜 肉制品检测项目:

方案概述:本篇将介绍两个肉制品中糖检测的方法:方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化,以LC/ELSD法分析;方法二:参考GB/T 9695.31-2008方法,使用分光光度法和直接滴定法分析

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更新时间2023年01月10日

上传企业绿巨研科贸易(上海)有限公司

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本篇中的肉制品,如素肉堡、腌渍鲜嫩鸡胸肉、原味炸鸡、辣味炸鸡、基础风味鸡肉丝、香料鸡排、鸡翅蓉、鸡肉热狗、香草鸡腿排等,在加工过程中添加复杂的佐料进行调味,这给肉制品中糖的定量分析造成很大困难。

肉制品中糖的定量分析有两个难点:

一、没有现成的定量分析标准方法可以参考。

二、净化不全的样品溶液上机LC/ELSD后,极易毁坏糖专用色谱柱和堵塞ELSD雾化器,消耗很大的维修成本;为了解决这个问题,巨研科技研发出FaAEx-AD2糖专用SPE净化柱,摸索出合适的前处理操作步骤和仪器分析条件。

此分析方法通过方法验证后,邀请业内同行进行实践验证,同行反馈FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化效果良好!

本篇将介绍两个肉制品中糖检测的方法:

方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化,以LC/ELSD法分析;

方法二:参考GB/T 9695.31-2008方法,使用分光光度法和直接滴定法分析。

方法一:使用巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化

以泰式調味腿肉片样品为例,测试果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麦芽糖(Maltose),样品加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心后取上清液。

将上清液通过FaAEx-AD2糖专用柱除杂(只需一步过柱),获得目标物溶液,过滤后上机到LC/ELSD进行定量分析。

1)前处理步骤:

样品均质

1g样品于离心管中,加10 ml 50%乙醇溶液

超声震荡20min

高速震荡10min

50%乙醇溶液定容至20 mL(固体样品:直接加10mL)

6000rpm离心30min

10ml上清液过巨研FaAEx-AD2 糖专用SPE柱,取滤液上机分析

(无须活化平衡,一步通过法获得目标物)

2)LC-MSMS分析出谱图如下:

image.png

 

3)小结:

使用FaAEx-AD2 糖专用SPE柱净化后,再上机分析,有两个好处:

  1. 果糖(Fructose)、山梨醇(Sorbitol)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(Glucose)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)和麦芽糖(Maltose)这7种糖的回收率在80-120%之间。

  2. 有效延长糖专用色谱柱的使用寿命,避免堵塞ELSD雾化器,大大降低耗材和配件的损耗成本。

  3. 前处理中已经进行萃取、超声和离心的净化操作,为什么还要开发FaAEx-AD2 糖专用柱再次除杂?

    答:因为离心得到的上清液过滤膜后上机分析,进几针样品后,糖专用色谱柱被污染、ELSD雾化器也很快被堵塞,基本不能进行日常的品控管理。

    离心得到的上清液经过FaAEx-AD2 糖专用柱净化后,有效地解决了这个问题,需要在日常做肉制品中糖测试的用户,持续回购FaAEx-AD2 糖专用柱。

    方法二:参考GB/T 9695.31-2008标准方法

关于肉制品中总糖的检测,我们有一个标准方法,即:GB/T 9695.31-2008肉制品 总糖含量测定》,以葡萄糖为对照物。

第一法适用于肉制品中总糖含量的测定使用分光光度法;

试样中的总糖含量以葡萄糖计。

image.png

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第二法适用于不含淀粉的肉制品中总糖含量的测定,使用直接滴定法测糖

image.png

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总结:

  1. 肉制品中糖的检测,若采用GB/T 9695.31-2008标准方法,前处理步骤操作复杂,耗时长,花费大量人力,分析结果的灵敏度比LC/ELSD法低,几乎不能做定量分析。

  2. 采用LC/ELSD法分析肉制品中的糖含量,难点在于怎么充分去除复杂样品中的杂质。通过在样品中加入10ml的50%乙醇溶液、超声、震荡、定容、离心、过滤这些步骤,回收率尚可,但除杂效果不佳,进样几次后,糖专用色谱柱被污染,甚至ELSD雾化器被堵塞,增加耗材和仪器配件的消耗成本。

  3、将离心后的上清液,一步法通过FaAEx-AD2糖专用SPE柱的净化、过滤后上机分析,可有效去除杂质,延长糖专用色谱柱和ELSD的使用寿命,且HPLC基线更加平稳,回收率表现更优(80-120%)。

 

 

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