东曹(上海)生物科技有限公司
新型FcR亲和色谱柱在细胞株筛选中的应用
检测样品:生物制品
检测项目:含量检测
方案概述:在单克隆抗体药物的初期研发阶段中,需要对细胞株进行筛选,选出能产生滴度较高、ADCC活性较高的细胞株。东曹公司推出的新型亲和色谱柱FcR-IIIA-NPR能够基于抗体糖链结构的差异,对细胞培养液中的抗体进行HPLC分析,将繁琐的抗体生物学活性测定法化繁为简,获得重复性良好的分析结果。
在单克隆抗体药物的初期研发阶段中,通过对细胞株(cell line)实施筛选,选出能产生滴度较高、ADCC活性较高的细胞株。此时常会用到的几种评估方法是,通过生物检定法测定ADCC活性;通过表面等离子共振法(SPR)测定人体IgG受体(FcγRIIIa等)的亲和力;通过LC/MS分析抗体酶切下来的糖链结构等,但是这些方法都需要花费大量的时间和人力。能够把这些复杂的评估分析法由繁化简,并快速完成分析的HPLC色谱柱就是TSKgel FcR-IIIA-NPR。
使用TSKgel FcR-IIIA-NPR,可以直接分离抗体,无需对细胞培养液进行前处理。抗体主要可以分离出3个洗脱峰。已有研究表明,抗体糖链末端的半乳糖数量越多,在此色谱柱中的保留能力越强,而保留能力越强的洗脱峰,其ADCC活性就越高1)-3)。
使用TSKgel FcR-IIIA-NPR,可以直接分离抗体,无需对细胞培养液进行前处理。抗体主要可以分离出3个洗脱峰。已有研究表明,抗体糖链末端的半乳糖数量越多,在此色谱柱中的保留能力越强,而保留能力越强的洗脱峰,其ADCC活性就越高1)-3)。
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