植物Ca2+-ATP酶ELISA试剂盒 酶联免疫检测

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被Ca2+-ATP酶（Ca2+-ATPase）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ca2+-ATP酶（Ca2+-ATPase）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法：植物Ca2+-ATP酶ELISA试剂盒 酶联免疫检测

1.  样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2.  标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。

3.  植物萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。

4.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

植物样本预处理方案：

1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨，如无液氮，剪碎，玻璃匀浆器研磨也可；

2、 加入样品体积9倍（鲜重：匀浆液体积）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 请于4℃ ，3000rpm，离心10min，收集上清；

4、 取上清检测。 

植物Ca2+-ATP酶ELISA试剂盒 酶联免疫检测实验前的准备：

1） 确定试剂盒在有效期内

2） 仔细阅读说明书，按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）

3） 提前准备好所有实验额外所需的设备（如离心机、37℃恒温箱、高精度加样器及枪头、酶标仪等）

4） 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者注意低温保存。根据检测标本数量确定所需试剂的量

5） 按说明书将所有试剂平衡至室温，配制所需试剂。严格按照说明书进行实验步骤。

我司推荐检测指标如下：