40275ES60 488 EdU细胞成像试剂盒(绿色荧光)
- 公司名称 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型号 40275ES60
- 产地 翌圣生物
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2022/5/8 19:53:41
- 访问次数 325
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
分子生物学试剂，细胞生物学试剂，免疫学试剂，蛋白组学试剂等
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100t |
|---|---|---|---|
| 货号 | 40275ES60 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
*（元）
Yefluor 488 EdU Imaging Kit
Yefluor 488 EdU细胞成像试剂盒（绿色荧光）
40275ES60
100 T
1583.00
1504.00
40275ES76
500 T
3183.00
3024.00
40275ES80
1,000T
4983.00
4734.00
产品描述
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。常用的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测是Brdu方法的升级和突破。EdU（5-溴-2-脱氧尿嘧啶）是一种嘧啶类似物，可在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测是基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。
试剂盒中EdU试剂含有炔烃，而Yefluor 488 Azide染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效，易于使用。只需少量的叠氮化染料即可有效地标记出整合的EdU。标准化的戊二醛固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞，而Brdu方法则需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用DNase消化）去暴露BrdU从而方便BrdU抗体结合。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份，可以检测细胞增殖与细胞周期分析。对于细胞周期的分析，试剂盒提供了细胞核染料Hoechst 33342。
光谱特性：Yefluor 488 Azide：Ex/Em=495/519 nm；Hoechst 33342：Ex/Em=350/461nm, bound to DNA。
产品组分
编号
组分名称
产品编号/规格
保存条件
40275ES60（100T）
40275ES76（500T）
40275ES80（1000T）
40275-A
10 mM EdU
0.2 mL
1 mL
2 mL
-20℃
40275-B
Yefluor 488 Azide
20 µL
100 µL
200 µL
-20℃避光
40275-C
10× Click-iT EdU反应缓冲液
1 mL
5 mL
10 mL
2-8℃
40275-D
CuSO4
0.5 mL
2.5 mL
5 mL
2-8℃
40275-E
Click-iT EdU缓冲液添加物
30 mg
150 mg
150×2 mg
2-8℃
40275-F
Hoechst 33342
25 µL
125 µL
250 µL
2-8℃
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20℃避光保存，有效期1年。
注意事项
1．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2．本产品仅作科研用途！
其他所需试剂
10 mM PBS, pH7.2-7.6
中性多聚甲醛固定液（4%多聚甲醛 in PBS ）
2 mg/ml 甘氨酸溶液（去离子水配制）
促渗试剂（0.5% Triton X-100 in PBS）
3% BSA in PBS, pH7.2-7.6
去离子水
18×18 mm 盖玻片
使用方法
1、EdU标记细胞
注意：EdU的标记浓度应根据所用的细胞类型做相应的优化选择，推荐客户以10 μM的EdU初始浓度进行摸索。细胞培养基、细胞生长密度及细胞类型和其他实验条件都有可能影响细胞的标记效果。预实验中我们建议客户设置一系列的EdU浓度梯度，以确定最佳的合适您的细胞的实验浓度。
1.1. 以每孔4×103-1×105细胞接种于96孔板中，进行您所需要的药物处理或者其他刺激处理。
1.2. 准备一份2×的EdU工作液（组分A）：以*培养基稀释10 mM的储液至合适的工作浓度。建议您以10 μM的初始工作浓度开始预实验。
1.3. 预热2×的EdU工作液，加入等体积的培养基，使浓度变为1×(如：需要得到10 μM的终浓度，应以新鲜培养基等体积加入到20 μM的EdU工作液中)。
1.4. 合适时间合适条件孵育细胞，EdU孵育细胞的时间可以直接用作测定细胞DNA合成的指标，时间点选择以及孵育时间的长度取决于细胞生长速率。通过短暂的EdU孵育进行的脉冲式标记细胞可以用于研究细胞周期动力学。
2、细胞固定及促渗操作
2.1. 孵育完成后，去除培养基加入50 μL 4%中性多聚甲醛至各个孔，室温孵育15-30 min后，去除固定液。
2.2. 每孔加入50 μL 2 mg/mL甘氨酸溶液，室温孵育5 min，中和残留的固定液。
2.3. 以每孔0.1 mL 3% BSA in PBS的洗涤液洗涤细胞2次。
2.4. 去除洗涤液，加入0.1 mL 0.5% Triton X-100 in PBS到每个孔中，室温孵育20 min。
注意：本参考步骤是针对以4%中性多聚甲醛固定且以0.5% Triton X-100促渗操作样本而优化的操作方法，但本参考所介绍的步骤同样可用于其他类似操作的样本，如以甲醇固定以皂苷固定的样本等。
3、EdU检测
注：本参考步骤每孔反应使用100μL的Click-iT反应混合物。用户可根据自己的样本情况调整等比例减少所用的溶液体积。
3.1. 准备1× Click-iTEdU反应缓冲液（组分C）：10×组分C试剂以去离子水稀释10倍即可。
3.2. 制备一份5×的Click-iTEdU反应添加物储液（组分E）：加0.3 mL去离子水至30 mg的E组分试管中（100 mg/mL），混匀至全部溶解。使用后，剩余储液存放在≤-20℃，可保存一年，溶液一旦呈现棕色，则说明有效成分降解不能再用（注意：不同规格的组分E均按照此比例加去离子水溶解为5×储液备用）。
3.3. 准备1× Click-iTEdU缓冲液添加物：以去离子水稀释5×储液（组分E）至1×，溶液应新鲜配置，当天用完。
3.4. 依据表1准备Click-iT反应混合物。表1要求添加的组分对于反应来说非常重要，否则反应无法有效进行。
表1 Click-iT反应混合物
反应组分
以10个孔的样本数为例
1× Click-iT EdU反应缓冲液（组分C）
860 µL
CuSO4 （组分D）
40 µL
Yefluor 488Azide（组分B）
2 µL
1×反应缓冲液添加物（步骤3.3所准备）
100 µL
总体积
1 mL
3.5. 去除促渗剂，以每孔0.1 mL的3% BSA in PBS的洗涤液洗涤2次，去除洗涤液。
3.6. 加入0.1 mL Click-iT反应混合物至每个孔，简短摇晃培养板以确保反应混合物可以均匀覆盖细胞。
3.7. 室温避光孵育30 min。
3.8. 除去反应混合物，每孔以0.1 mL 3% BSA in PBS洗涤两次，去除洗涤液。
对于核染色，可以进行DNA复染。如其他无特别要求，即可进行拍照分析。
4、DNA复染（可选）
4.1. 以0.1 mL PBS洗涤每孔1次，去掉洗涤液。
4.2. 以PBS稀释Hoechst 33342（组分F）储液1:2,000至1× Hoechst 33342溶液，终浓度为5 µg/mL。
4.3. 每孔加0.1 mL 1× Hoechst 33342溶液，室温避光孵育15-30 min。除去Hoechst 33342溶液。
4.4. 0.1 mL PBS洗涤每孔2次，去除洗涤液。
HB220418
采购中心
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