40618ES05 支原体qPCR检测试剂盒（探针法）
- 公司名称 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型号 40618ES05
- 产地 上海
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2023/3/15 9:00:52
- 访问次数 569
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
分子生物学试剂，细胞生物学试剂，免疫学试剂，蛋白组学试剂等
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 5T |
|---|---|---|---|
| 货号 | 40618ES05 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
MycAwayTM Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 支原体qPCR检测试剂盒（探针法） | 40618ES25 | 25 T | 3155 |
40618ES60 | 100 T | 10355 |
产品描述
MycAwayTM Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit 作为精确支原体检测试剂盒，可用于确定如细胞库、病毒种子、临床治疗用途的细胞和生物制品中是否存在支原体污染。本试剂盒采用荧光探针qPCR法技术，定性检测待测样本中支原体DNA，可覆盖100多种支原体DNA序列；具备高灵敏、高特异、高效率、安全高等优势，严格按照EP2.6.7和JPXVII支原体检测相关标准要求进行验证。
本试剂盒包含内部质控（IC），可用来判断待检样本中是否包含对扩增反应存在抑制的因素，从而达到防止假阴性结果的产生；内部质控（IC）也可在样本提取阶段加入，以评估提取效果。本试剂盒与支原体DNA提取纯化试剂盒配套使用，高效提取样本中的支原体DNA，检测限可达到10 CFU/mL，最高灵敏度可达1 CFU/mL。
产品组分
编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
40618ES25 (25 T) | 40618ES60 (100 T) | ||
40618-A | 4×MyqPCR Reaction Buffer | 250 μL | 1 mL |
40618-B | MyPrimer&Probe MIX | 25 μL | 100 μL |
40618-C | 内部质控（IC） | 25 μL | 100 μL |
40618-D | 阳性质控（PC） | 500 μL | 2 mL |
【注】：阳性质控（PC）浓度为1000copies/µL。
运输储存方法
干冰运输。-20℃保存，有效期一年。
注意事项
1）使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。
2）加样和配液步骤都尽量在冰上操作。
3）每个组分在使用前都应震荡混匀，低速离心。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5）本产品仅作科研用途。
适用机型
PRISM®7500Real-Time PCR System、QuantStudio™5（ABI）；CFX96（Bio-Rad）
实验设计
一、待测样本DNA提取
建议使用QIAGEN公司的QIAamp DNA Mini Kit提取样本DNA。
二、qPCR反应体系的准备
1）根据所要检测样本的数量，计算所需反应孔数，一般做2个重复孔。
反应孔数=（1个阳性质控PC+1个无模板对照NTC+N个待测样本）×2
2）根据表1反应体系，将所需试剂放冰上融化。
3）根据反应孔数计算所需要的qPCR Mix的量。
Mix=（反应孔数+2）*（10+1+1+8）（包含加样损失）
表1 反应体系（以40 μL为例）
组分 | 单孔体积（μL） | 终浓度 |
4× MyqPCR Reaction Buffer （40618-A) | 10 | 1× |
待测样本DNA/阳性质控 | 20 | |
MyPrimer&Probe MIX (40618-B) | 1 | 0.4 μM |
IC (40618-C) | 1/0* | |
超纯水 | Up to 40 | |
Total | 40 |
【注】：1）为保证实验的稳定性，40618-A、40618-B组分需储存于-20℃。
2）为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将40618-C、40618-D分装储存于-80℃。
3）qPCR Mix配制过程不加待测样本DNA与阳性质控。
4）1/0代表NTC反应孔中是否添加IC，使用试剂盒时建议加上IC，可以更好的确认体系是否配置正确。若不加，结果判断请参照结果分析提示。
三、加样
1）充分震荡混匀qPCR Mix，低速离心，将管盖残留液体收集至管底。
2）向每孔反应管中分装20μL qPCR Mix。
3）向已分装过qPCR Mix的反应管中加入样品，示例如下：
表2 加样示例
待测样本DNA | 20 μL qPCR Mix+20 μL 待测样本DNA |
NTC对照 | 20 μL qPCR Mix+20 μL DNA Elution Buffer （或者ddH2O） |
阳性质控（PC） | 20 μL qPCR Mix +20 μL 阳性质控 |
【注】：此时每个反应孔的体积为40μL
4）盖上反应管盖子或者贴上光学膜，为避免影响荧光信号读取，请注意不要在管盖或者膜上做标记，或者用刮板反复摩擦。
5）反应管短时低速离心，将管壁液体收集至管底；充分震荡混匀后，再短时低速离心，将管盖和管壁的残留液体收集至底，如有气泡，需将气泡排尽。
qPCR程序参数设置
1、创建目的通道探针：
创建目的通道的FAM探针，选择报告荧光基团为FAM，猝灭荧光基团为none；
创建IC 通道的VIC探针，选择报告荧光基团为VIC，猝灭荧光基团为none；
选择检测参比荧光为ROX（可选择，试剂盒中不含）。
2、标准扩增程序：
反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
1 | 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
2 | 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 45 |
62℃* | 30 sec |
【注】：* 荧光信号采集。
结果分析
1、PC、NTC结果判断:
质控样本 | FAM 信号 | VIC 信号 |
PC | Ct<40 ,且有明显的扩增曲线。 | Ct<40 ,且有明显的扩增曲线。 |
NTC | Ct≧40 ,或无明显的起峰。 | Mix 中添加内参IC ，Ct<40 ,且有明显的扩增曲线。 |
Ct≧40 ,或无明显的起峰。 | Mix 未添加内参IC ，Ct≧40 ,或无明显的起峰。 |
2、待测样本检测结果判定：
FAM 信号 | VIC 信号 | 结果判断 |
Ct<40 ,且有明显的扩增曲线 | Ct<40 ,且有明显的扩增曲线 | 阳性 |
Ct≧40 ,或无明显的起峰 | 有抑制 | |
Ct≧40 ,或无明显的起峰 | Ct<40 ,且有明显的扩增曲线 | 阴性 |
Ct≧40 ,或无明显的起峰 | 有抑制 |
【注】：*VIC信号如果有抑制，需重测或对样本进行合适处理消除抑制因子
HB220112
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