ECT001 DNA流式细胞仪试剂ECT001

DNA流式细胞仪试剂ECT001

DNA流式细胞仪试剂ECT001

细胞活力染色：一步，即可使用。使用碘化丙啶，可通过膜渗透快速杀死死细胞。

用于流式细胞术的DNA标准：基于鳟鱼红细胞（TRBC）的DNA标准，该标准无毒且针对流式细胞术进行了优化。

核隔离培养基（NIM）：从细胞，组织，冻融的组织或脱脂的/酶分离的组织中分离完整的细胞核。

技术指标

文献资料

建议的协议

细胞生存力染色剂：将100uL细胞生存力染色剂与100uL细胞以1x10 ^ 5-1x10 ^ 6细胞/ mL的比例混合）

用于流式细胞术的DNA标准液：以1-2x10 ^ 6细胞/ mL的浓度将50uL的DNA标准液添加到1mL的细胞中。离心成沉淀并重悬于仅NIM（定制染色），NIM-DAPI或NIM-PI中。或者，可以将部分DNA标准品和细胞直接添加到1 mL NIM溶液中，并进行染色，无需离心。分析前，应将悬浮液在冰或室温下放置2-3分钟。

核分离培养基（NIM）：与DNA标准品（参见上文）一起，将离心沉淀重悬于100uL仅NIM（用于定制染色），NIM-DAPI或NIM-PI中。或者，可以将部分DNA标准品和细胞直接添加到1 mL NIM溶液中，并进行染色，无需离心。分析前，应将悬浮液在冰或室温下放置2-3分钟。

数据

具有TRBC DNA标准和核隔离介质（NIM-DAPI）的扁桃体

将DNA标准品与NIM-DAPI混合，并通过37µm过滤器过滤。用于建立流式细胞仪的DNA标准在CV = 1-2％的范围内运行。其次，在样品运行期间，DNA标准品在通道50（约5.0 pg /核）处达到峰值。通过使用人类扁桃体确定CV = 2-3％，G0扁桃体核的相对DNA值为7.4 pg /核，使用通道50中的位置来确保对位酶起作用。对照石蜡化的人扁桃体组织也进行了脱蜡和酶解，以确保PARA试剂功能正常。每次确定良性和癌性组织的DNA直方图测量值时，所有扁桃体对照均为CV = 2-3％。另外，所有DNA标准样品的CV = 1-2％。（A）典型的DNA标准鳟鱼红细胞（TRBC）值。CV ＝ 1.42±0.19SD，n ＝ 66。（B）具有DNA标准的人类扁桃体。22个样品的数据得出的平均变异系数为2.18±0.46 SD，平均DNA指数为1.42±0.03 SD，平均S相分数为4.37±1.37 SD。

改编自： Thornthwaite，JT等。J.实体瘤3：12-23（2013）。

提供者

来自西田纳西州癌症研究所