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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 制药/生物制药 |
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进口elisa酶联免疫试剂盒IBL原理:
采用双抗体夹心法测定人雄激素结合蛋白(ABP)水平。用纯化的人雄激素结合蛋白(ABP)抗体包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入HRP标记的ABP抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的ABP含量呈正相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),根据标准曲线,计算测试样品中ABP浓度。
实验材料与试剂配制:
仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
缓冲液使用:加5ul的缓冲液于50ul的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。
洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。
样品收集、处理及保存:
细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上
清。
体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
进口elisa酶联免疫试剂盒IBL保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。