PC011 HUVEC, 人脐静脉内皮细胞

培养条件

培养基：DMEM/F12+10%FBS 
气相：空气，95%；二氧化碳，5% 
温度：37℃

细胞描述

细胞生长：贴壁生长
细胞形态：Cobblestone appearance with large dark nuclei; during proliferation, cells are small and evenly sized, display a high mitotic index and show no presence of smooth muscle cells. 
细胞数量：1×10⁶个
细胞传代：1:2~1:4传代；2~3天换液1次
细胞说明：Human Umbilical Vein Endothelial Cells.
细胞纯度：93％
细胞活力： >90%
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+10%FBS）
细胞运输：干冰运输（1管）/ T-25培养瓶一瓶
细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗
细胞传代方法：

1. 显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖*的时候才传代，那样细胞容易老化。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍。
3. 加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟。
4. 然后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟。
5. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。

细胞复苏方法：

1. 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入9 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）
4. 弃去上清，再加入5ml DMEM/F12+10%FBS*培养基，转入T-25培养瓶中培养。

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