PCE03 小鼠神经干细胞（EGFP标记）

培养条件

• 培养基：DMEM/F12+1%N2+2%B27
• 气相：空气，95%；二氧化碳，5%
• 温度：37摄氏度

细胞描述 

细胞描述：本公司培养出品的神经干细胞（NPC）取自12天EGFP绿色荧光蛋白标记C57小鼠胚胎的端脑，用DMEM/F12+1%N2+2%B27*培养基进行原代培养和传代。
细胞规格：10⁶/管
细胞活力：＞90%
细胞代数：原代
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）

细胞复苏

1. 取出冻存管后，立刻放入37℃水浴中，轻轻晃动至*融化。
2. 用70%酒精消毒冻存管壁外侧后，转入生物安全柜或者超净台中，将管内细胞转移至离心管中，慢慢加入9 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 1000rpm离心5 min。
4. 去掉上清，再加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27*培养基，转入培养瓶中培养。

细胞传代

1. 显微镜下观察，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5min，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在生物安全柜或者超净台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化成单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5min。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。

细胞冻存：本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO冻存液。

细胞图片：100x荧光显微镜照片（绿色：细胞持续表达EGFP）

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