PC057 NSC，大鼠神经干细胞

培养条件

• DMEM/F12；N2，1%；B27，2%
• 气相：空气，95%；二氧化碳，5%
• 温度：37摄氏度

细胞描述

细胞描述：本公司培养出品的神经干细胞（NSC）取自12天wisdar大鼠胚胎的端脑。
细胞代数：P3
细胞生长：神经干细胞悬浮成“神经球”生长。
细胞规格：1ml 冻存管 （1x106）或者 1个25cm2的培养瓶。
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞传代

1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。

2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。

3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。

4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。

5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。

6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。

细胞复苏

1. 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。

2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。

3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。

4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27*培养基，转入培养瓶中培养。

细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）。
细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。

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