无血清培养基特性及应用说明2025/07/30

血清是细胞培养中重要的添加剂，提供了细胞生产所需的很多营养物质，包括蛋白质，生长因子，脂类，激素等等。然而，由于血清的成分比较复杂且无法测定，并且不同批次血清成分差异较大，使用无血清培养基可以很好的弥补使用血清带来的一些问题，也为实验的标准化和重复性带来很大的帮助。一、无血清培养基的分类无血清培养基的发展经历了包括无血清来源，无动物来源，无蛋白和化学成分限定几个阶段。无血清培养基在发展中逐渐摆脱对天然血清和动物源成分的依赖，在成分上更加的精准，明确和标准化，也可以避免外源物的污染，在生命科学领域

ELISA（酶联免疫吸附测定）样本不显色解读2025/07/21

ELISA（酶联免疫吸附测定）中，如果标准品显色但样本不显色，可能由以下几个原因造成：1.样本保存或处理不当：如果样本在保存或处理过程中发生了降解，或者样本中待检测的抗原浓度过低，都可能导致样本不显色。2.抗体特异性或浓度问题：使用的捕获抗体和检测抗体可能与样本中的抗原不匹配，或者抗体浓度不足，导致特异性结合不充分。3.孵育条件不适宜：孵育温度、时间或缓冲液条件不适当，可能影响抗原抗体的结合效率。4.封闭不充分或封闭液问题：封闭步骤如果未充分进行，可能会导致非特异性结合增加，从而掩盖了特异性信号

聚合酶链式反应（ PCR）技术循环检测方法2025/07/15

聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction,PCR）是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术。其核心原理是模拟生物体内的DNA复制过程，通过特定的引物、DNA聚合酶和dNTPs（脱氧核糖核苷酸）来实现目标DNA序列的指数级扩增。PCR技术的实现依赖于三个关键步骤的循环进行：一、变性（Denaturation）：在高温（通常90-96℃）下，双链DNA模板中的氢键断裂，导致双链分开为两条单链。这是扩增过程中的第一步，也是将模板DNA变成单链状态的过程。二、退火（Anneal

微生物菌种活化方法汇总2025/07/08

微生物菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。菌种活化是指将长期保存的菌种恢复到具有生长活力的状态，以便于进一步的培养和使用。根据菌种的保存方式，活化方法可以分为以下几种：1.冻干粉或载体保存形式的活化：首先，将冻干粉或载体保存的菌株加入少量生理盐水或非选择性肉汤培养基中进行溶解悬浮。使用划线

ELISA实验保存标本异常问题解析2025/07/03

ELISA酶联免疫吸附实验免疫分析是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生的高选择性高特异性识别和结合原理，对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法，酶联免疫吸附分析（下称ELISA）是免疫分析的一种，分三个部分组成：免疫识别，信号输出和数据处理。ELISA试剂盒标本保存，在ELISA试剂盒实验中是非常重要的。标本保存不当可能会导致实验结果异常，如颜色背景深、非特异性染色、标准曲线不佳等问题。以下是一些解决这些问题的方法：1.颜色背景深/非特异性染色1)充分清洗酶标板：确保每个微孔的洗涤液量一致，清洗后

细胞培养的具体流程详述2025/06/25

细胞培养是指将细胞从生物体中取出，置于合适的体外环境中，使其生长和繁殖的过程。这包括了原代培养（直接从生物体分离的细胞在人工培养环境中增殖）、传代培养（将培养的细胞按一定比例稀释并重新接种到新的培养器皿中）以及细胞系和细胞株的建立。细胞培养的关键在于提供适宜的营养、生长因子、激素、气体环境（如5%CO2和37℃）以及维持合适的pH和渗透压。细胞根据其生长特性可以分为贴壁生长和悬浮生长两种类型。贴壁生长细胞需要附着在支持物表面才能生长，而悬浮生长细胞则可以在悬浮状态下增殖。细胞培养过程中，需要关注

ELISA实验中的洗板步骤关键环节2025/06/17

ELISA实验是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生的高选择性高特异性识别和结合原理，对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法，酶联免疫吸附分析（下称ELISA）是免疫分析的一种，分三个部分组成：免疫识别，信号输出和数据处理。ELISA实验中的洗板步骤是确保实验结果准确的关键环节，涉及多个关键点：1.洗涤参数：-洗涤量：自动洗板机通常建议使用350µl的洗涤液来确保清洗整个反应孔的壁。洗涤量应比包被体积稍高，以减少未结合抗体的背景信号。-均匀性：所有反应孔的洗涤量必须一致，确保每次洗涤都达到相同的效果

抗体验证方法策略探究2025/06/10

抗体验证是确保抗体在科学研究中具有特异性、准确性和可靠性的关键步骤。这一过程对于生物科研的成功至关重要，但很多科研人员却忽视了其重要性。根据Nature在2016年发表的文章，尽管准确的实验结果依赖于抗体的功效符合预期，但仍有将近三分之一的初级科学家们不进行任何抗体验证。抗体验证的重要性：1.避免假阳性与假阴性结果：表现糟糕的抗体会产生假阳性信号，即结合目标蛋白之外的其他蛋白，以及假阴性信号，即无法与正确的蛋白结合。这会导致科学家和期刊杂志撤回将要发表的论文，干扰科研工作并导致错误的研究结论。2

PCR电泳中的非特异性扩增避免策略汇总2025/06/04

PCR电泳中的非特异性扩增是指在聚合酶链式反应（PCR）扩增过程中，除了目的DNA片段外，还扩增出与目的条带大小不一致的条带，这些条带可能大小不一，从几条到十几条都有可能。避免PCR电泳中的非特异性扩增可以通过以下策略：1.优化引物设计：确保引物具有高特异性，避免引物自身形成二聚体。使用软件设计引物时，应选择保守区，长度在1827bp之间，上下游引物Tm值为6075℃，GC含量保持在40%60%之间，且引物间不应存在互补序列，以减少非特异性结合。2.调整退火温度：通过梯度PCR确定最适退火温度，

菌种保藏和复苏具体的操作步骤2025/05/27

菌种保藏（culturepreservation，culturecollection）是保持微生物菌株活力和遗传性状的关键技术。在分子生物学研究中，经过基因编辑或改造的菌种通常非常珍贵且微量，因此需要进行妥善的保藏。以下是具体的操作步骤：菌种保藏：1.将待保存的菌液与配好的甘油混合液按1:1比例混合，最终达到20%甘油浓度。配置40%（v/v）甘油灭菌水混合液。2.取2ml离心管或保菌管，加入500微升40%甘油-水混合液。3.用移液枪吸取500微升菌液，将枪头深入液面以下缓缓加入。4.将离心管

使用ELISA洗板机洗板的关键点有哪些？2025/05/19

ELISA洗板机是专门用于清洗酶标板的仪器，能够提高清洗效率和结果的一致性。以下是使用ELISA洗板机洗板的关键点：1.选择合适的洗板机：1)关键指标：确保洗板机的残留量≤2μL/孔，这是评价洗板效果的重要标准。2)洗板环境：选择能提供不同洗板环境的设备，适应不同的实验需求。3)可靠性：考察仪器的稳定性和洗涤效果，以及售后服务和配件的充足性。2.洗板机的操作：1)参数设置：包括洗涤量、洗涤次数和抽吸高度。例如，使用350µl洗涤液进行洗涤，可以清洁整个反应孔的壁，洗涤次数通常在3次左右，以平衡背

对照品和标准品各方面比较盘点2025/05/14

对照品和标准品一样是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质，它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础，它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具;是测量药品质量的基准;也是作为校正测试仪器与方法的物质标准。在药品检验中，它是确定药品真伪优劣的对照，是控制药品质量必须用的工具。一、概念：对照品与标准品是2个不同的概念，中国药典凡例中已有明确的定义:文献中常将2种概念混淆，认为对照品就是标准品，是1种物质2种提法而已[1，2]，造成错

实时荧光定量PCR(qPCR)技术基本原理介绍2025/05/07

实时荧光定量PCR（Real-timequantitativePCR,qPCR）是一种在PCR反应体系中加入荧光标记物，通过实时监测每个PCR循环中的荧光信号变化，实现对起始模板量的定量分析的技术。这项技术由美国AppliedBiosystems公司在1995年推出，标志着PCR技术从定性分析到定量分析的飞跃。实时荧光定量PCR（qPCR）的基本原理包括三个主要阶段，这些阶段反映了PCR扩增过程中的荧光信号变化：1、基线期：在PCR反应开始时，荧光信号几乎不变，主要是因为背景荧光的存在掩盖了PC

成纤维细胞生长因子 2（FGF - 2）ELISA 试剂盒功能作用2025/04/28

成纤维细胞生长因子2（FGF-2），又称为碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），是一种在生物体内具有广泛生物学活性的蛋白质。FGF-2是一种多肽生长因子，由155个氨基酸残基组成，相对分子质量约为18kDa。它具有典型的FGF家族结构特征，包括一个核心的β-折叠结构域，以及一些α-螺旋和环结构，这种结构有助于FGF-2与受体结合并发挥作用。功能作用：1、促进细胞增殖：FGF-2对多种细胞类型具有促进增殖的作用，包括成纤维细胞、内皮细胞和神经细胞等。在创伤修复过程中，FGF-2能够刺激成纤维细胞的增

ELISA酶联免疫吸附试验洗涤过程详述2025/04/21

ELISA（EnzymeLinkedImmunosorbentAssay）酶联免疫吸附试验优化的重点之一在于洗涤。洗涤步骤可降低未结合抗体所引起的背景信号，从而增加分析的信噪比。每一步之间的洗涤确保只有特异的结合事件被保留，在最后一步产生信号。而不充分的洗涤会导致差异和高背景，从而带来不理想的结果。下面将为你介绍一些利用自动洗板机来洗涤ELISA平板的技巧。免疫分析，比如ELISA，一般包含两个或以上的孵育步骤，中间以洗涤隔开。ELISA通常在96孔板中开展，其上包被了结合抗原或抗体。在封闭步骤

生化试剂盒试验问题解析2025/04/15

1.生化试剂盒的测定原理？生化试剂盒通过化学反应/酶促反应或物质结构特点测定样本中物质含量或酶活；所用仪器一般为分光光度计和酶标仪，两者的测定原理都是朗伯比耳定律:A=kbc，即当适当波长的一束平行单色光照射固定浓度均匀溶液时，其吸光度与光通过的液层厚度成正比。土壤、水质、动植物组织、血清、细胞细菌、食品等样本均可以进行测定。2.如何选择不同规格的试剂盒？首先根据本实验的实际情况选择，实验室有酶标仪的且有该检测波长的可以选择微量法试剂盒；实验室有分光光度计的，且有相应规格的比色皿既可以选择常量法

PCR实验室被污染处理探究2025/04/08

有实验室的地方，就不可避免的会出现实验室污染。实验室的污染，不仅会影响实验与科研的质量和效果,还对实验室工作人员的身体健康有损害，现在来一起了解下PCR实验室的污染原因及解决方法。一、PCR实验室污染分类：标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。PCR试剂的污染：主要是由于在PCR试

聚合酶链式反应（PCR）条件温度和时间设置2025/04/01

聚合酶链式反应（PCR）原理是生物学的聚合酶链反应。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。PCR反应条件的选择技巧主要体现在温度、时间和循环次数上，温度过高，延伸时间不够都会对实验结果有很大的影响，以下总结方法技

化学实验室安全性具体防护措施2025/03/24

在实验室做实验，一定要注意实验的安全，毕竟化学药品大多数都是电邮一定毒性的，一旦出现问题，影响不容小觑，甚至可能会危及生命。化学实验室个人防护措施：1、眼睛及脸部的防护（1）、全防护眼镜（眼睛及脸部是实验室中最易被事故所伤害的部位，因而对他们的保护尤为重要。实验室内，氖实验人员必须戴安全防护眼镜（2）、当化学物质溅入眼睛后，应立即用水彻di冲洗。冲洗时，应将眼皮撑开，小心地用自来水冲洗数分钟，再用蒸馏水冲，然后去医务室进行治疗。（3）、面部防护用具用于保护脸部和喉部。为了防止可能的爆炸及实验产生

微生物培养基应用必看干货汇集2025/03/17

培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节，培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。一、培养基的购置与验收1.购置从培养基自身的质量来看，不同生产厂家的产品，甚至同一厂家不同批号的产品都会存在差异。依据ISO/IEC17025《检测和校准实验室能力的通用要求》，对培养基的供应企业进行评价后选择合格的供应商，这是培养基购买过程中重要的步骤。应选择产品市场信誉