食品中霉菌检测常见问题的讨论与分析及注意事项！

一、霉菌

不是分类学上的名词，而是一些丝状真菌的通称，属真菌的一部分；其对人类具有双重性，有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等，不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂，也感染并引起人类和动、植物的多种疾病，少数种类，如黄曲霉，能产生是一种致癌物质，危害人、畜的健康和生命。因此，霉菌的检测对于食品的安全性很重要。

食品中常见的霉菌：毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。

二、检测中的注意事项

1、取样的代表性。

2、取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高，所以，取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。

3、检样的方法。

(1)由于霉菌易被携带，所以，检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。

(2)样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的，故均质和振摇能使其充分散开，同时，在各梯度连续稀释时，也要用灭菌吸管反复吹吸几次，使孢子充分散开。

4、培养温度和时间。培养温度 25-28℃培养，5 天后观察。

霉菌检验中常用的培养基：孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。

5、检样中常见的问题。

(1)不同稀释度计数结果不相同；

(2)不生长或生长很好连成片无法计数；

原因：①稀释时未经反复振摇，吹吸，导致孢子未充分散开，影响了计数的结果。

②由于培养基不适宜，PH 值低等，致使生长较慢。

③观察时间的掌握。真菌生长较慢，故需 5d 后才能观察出结果。

三、微生物操作中常见问题的讨论与分析

1、划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因：

(1)平板上有过多的水分；

(2)划线时接种环未经反复灼烧；

(3)多区划线，三区或四区划线。

2、涂布和倾注的区别：

涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有少量的菌液，可能影响计数的准确性；倾注更为准确，但不利于观察菌落的状态。

3、培养基配制时应注意的问题：

(1)灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量；

(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分；

(3)培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏；

(4)含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。

4、平板的保存：

大多数平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。

5、产品的保存：

(1)干粉培养基：避光干燥，结块后不能使用。

(2)亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等：冷冻保存，使用时，要常温解冻，避免水浴加热。

(3)抗生素类：冷藏保存，温度过高会导致灵敏度的下降。

(4)兔血浆：冷藏保存少量的红色不会影响结果。

6、观察时间的掌握：

按 SN、GB 等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察，时间过短或时间过长，单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基，时间短单菌落看不到卵磷脂环，时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此，时间过长，李氏菌使整个平板成黑色，不利于观察单个菌落。

7、添加剂的添加：

(1)温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

(2)定量。过多会抑制一些目标菌，太少又导致杂菌的过度生长。

8、培养温度的掌握：

(1)真菌类。25-28℃培养

(2)细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在 30℃左右。

(3)其他一般在 36℃左右。

9、接种方法：

常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。

10、革兰氏染色方法：

染色时间的掌握、冲洗的方法。

11、生化实验：

(1)接种的方法

(2)氧化型和发酵型实验操作

(3)阳性菌种的对照

(4)接种前的纯化。挑取单个菌落进行一系列的生化。

12、关于杀菌的几个概念：

(1)抑制：是在亚抑制剂量因子作用下导致微生物生长停止，但在移去这些因子后生长仍可以恢复的生物学现象。

(2)死亡：在致死剂量因子的作用下或在亚致死剂量因子长时间的作用下，导致微生物生长能力不可逆丧失，即使移去这种因子后生长仍不能恢复的生物学现象。

(3)防腐：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生长的一种措施，它能防止食物防止食物霉变。

(4)消毒：利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所原微生物的一种措施，它可以起到防止感染和传播的作用。

(5)灭菌：利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所原微生物的一种措施。

北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！