MU392A-UC CDX-2 小鼠单克隆抗体用户指南

MU392A-UC CDX-2 小鼠单克隆抗体用户指南

一、产品概述

MU392A-UC CDX-2 小鼠单克隆抗体是一款专为科研用途设计的高效免疫试剂，由Biogenex公司研发生产。该抗体通过杂交瘤技术制备，针对CDX2（Caudal Type Homeobox 2）蛋白设计，能够特异性识别并结合CDX2抗原，广泛应用于肠道上皮细胞分化、增殖及肿瘤发生机制的研究。CDX2作为肠道特异性转录因子，在维持肠上皮细胞稳态中发挥关键作用，其异常表达与多种肠道肿瘤（如结直肠癌）密切相关。

二、产品特点

1. 高特异性：抗体经严格验证，仅识别CDX2蛋白，与其他肠道相关蛋白无交叉反应，确保实验结果的准确性。

2. 高灵敏度：适用于免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）、免疫沉淀（IP）及Western Blot（WB）等多种实验技术，可检测低丰度CDX2表达。

3. 稳定性强：抗体溶液采用Protein A/G亲和层析纯化，并添加50%甘油和0.02%叠氮钠，确保长期储存（-20°C）下的活性。

4. 广泛适用性：抗体可识别人、小鼠及大鼠来源的CDX2蛋白，适用于跨物种研究。

三、技术参数

• 抗体类型：小鼠IgG2b亚型单克隆抗体

• 克隆号：4B9

• 免疫原：重组人CDX2蛋白（1-313氨基酸）

• 应用稀释比：

• WB：1:500 - 1:1000

• IF：1:50 - 1:200

• IP：1:20

• 储存条件：短期（4°C）或长期（-20°C）保存，避免反复冻融。

• 靶点特异性：仅识别CDX2蛋白，不与其他同源蛋白（如CDX1、CDX3）交叉反应。

四、实验应用指南

（一）免疫组化（IHC）

1. 样本准备：石蜡切片或冰冻切片，脱蜡至水化。

2. 抗原修复：使用pH 6.0柠檬酸盐缓冲液进行高压修复或EDTA修复。

3. 抗体孵育：

• 一抗：稀释至推荐浓度，4°C过夜或37°C孵育1小时。

• 二抗：HRP标记抗小鼠IgG，37°C孵育30分钟。

4. 显色：DAB显色液显色，苏木精复染，脱水封片。

5. 结果观察：阳性信号为细胞核或细胞质棕黄色染色。

（二）免疫荧光（IF）

1. 样本准备：细胞爬片或冰冻切片，4%多聚甲醛固定。

2. 抗体孵育：

• 一抗：稀释至推荐浓度，4°C过夜。

• 二抗：Alexa Fluor 488/594标记抗小鼠IgG，避光孵育1小时。

3. 核染色：DAPI染色5分钟。

4. 封片：抗荧光淬灭封片剂封片，激光共聚焦显微镜观察。

（三）Western Blot（WB）

1. 样本准备：组织或细胞裂解液，定量后上样。

2. 转膜：PVDF膜，100V恒压转膜1.5小时。

3. 抗体孵育：

• 一抗：稀释至推荐浓度，4°C过夜。

• 二抗：HRP标记抗小鼠IgG，室温孵育1小时。

4. 显影：ECL化学发光液显影，Image Lab软件分析。

五、质量控制与验证

• 特异性验证：通过WB、IHC及IP实验，确认抗体仅识别CDX2蛋白，无其他非特异性条带或信号。

• 批间一致性：不同批次抗体经严格质控，确保实验结果重复性。

• 参考文献支持：抗体性能已发表于多篇高影响力期刊，支持其在肠道肿瘤研究中的应用。

六、注意事项

1. 实验优化：建议根据实验类型和样本类型，预实验优化抗体稀释比和孵育条件。

2. 安全操作：抗体溶液含叠氮钠，避免接触皮肤和黏膜，操作时佩戴手套和护目镜。

3. 储存条件：严格遵循-20°C保存要求，避免反复冻融。若需分装，建议使用无菌离心管，-70°C长期保存。

4. 仅限科研使用：本产品不可用于临床诊断或治疗。

七、常见问题解答

1. Q：抗体出现沉淀是否影响使用？
   A： 轻微沉淀不影响活性，离心后取上清使用；若沉淀严重，请联系供应商。

2. Q：抗体是否支持多物种检测？
   A： 本抗体可识别人、小鼠及大鼠CDX2蛋白，但需根据物种优化实验条件。

3. Q：抗体能否用于流式细胞术？
   A： 本产品未针对流式优化，建议选择专用流式抗体。