ELISA的基本设计如下:
用分析物或捕获一抗涂覆微孔板表面提供的固相。 使用封闭溶液封闭固相上剩余的未被占据的结合位点。 如果分析物包被在固相上,则添加抗分析物第一抗体用于检测 另一方面,如果固相被抗分析物一级抗体包被,则分析物被添加到孔中以被抗体捕获,随后是洗涤步骤。之后,添加第二种抗分析物初级抗体来检测捕获的分析物 多余的试剂被洗掉,使结合的分析物与游离的分析物分离。 加入能够识别检测抗分析物第一抗体的酶缀合物,随后进行洗涤步骤 加入酶的底物以产生与目标分析物水平成比例的有色产物。
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