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U266人骨髓瘤细胞培养说明书

来源:上海研谨生物科技有限公司   2020年04月30日 14:56  

细胞信息表

 

细胞名称         U266人骨髓瘤细胞

种属            人

组织来源          外周血

生长状态          悬浮细胞

培养条件          培养基类型:RPMI1640培养基

                                                FBS:10%

              抗生素:双抗

              培养条件:37℃,CO2:5%

 

传代方法 :

收到细胞后,在倒置显微镜下观察细胞生长状态:

如果没长满,将培养瓶用75%酒精消毒后在超净台内更换新鲜培养液,继续培养。

如果细胞已经长满(约80%-90%)则传代后继续培养。

 

贴壁细胞传代方法:

  1弃去培养基,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

  2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),让胰酶与大部分细胞接触后放入37℃培养箱内,随时观察细胞状态变化,待细胞大部分变圆后加*培养基终止消化。

 

悬浮细胞传代方法:可以直接传代也可以离心法传代。

  1直接传代是让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清吸掉1/2-2/3,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

  2离心法传代是将细胞连同培养液一并转移到离心管内,1000rpm,5分钟,去除上清,加新的培养液到离心管内,吹打细胞形成细胞悬液后,分别接种到其他培养皿或培养瓶中继续培养。

一般没有特殊说明,细胞一般是一传二。

 

冻存方法:

70%*培养基,20%FBS,10%DMSO,现用现配。

储存:液氮中长期保存。

注  1观察细胞建议在低倍镜下观察,便于整体估计细胞密度。

2在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落,可离心吹打后重新种入瓶中培养。

3收到细胞后若发现培养瓶破损、细胞污染等,请在一周内与我们联系。

 

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