Ramos 人Burkitt's淋巴瘤细胞
Catalogue No.: C446
Product Format: frozen
Culture Properties:悬浮
Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
Item | Specifications |
Cell | 2 tubes (1X10 6次方 cells/tube) |
Manual | 1 copy |
Operation steps for cell culture
- 轻轻吹匀细胞,收集悬液1000rpm(150g左右)离心3min,弃上清;
- 用新的*培养基重悬细胞,均匀分为几份,接种到新的培养瓶中,并补加足量的*培养基;
(悬浮细胞比较依赖细胞密度,细胞传代前及传代后密度不宜过低,过低可能会导致细胞生长缓慢或者死亡。细胞传代前培养基不能*变黄,不然细胞状态变差会导致传代失败。传代过程吹打细胞应尽量轻柔,不应吹出过多气泡。)
- 将细胞放回37度培养箱继续培养。
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
Cell cryopreservation
- 冻存液:92%*培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
- 降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
Tips:
- 细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞后死亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。加5ml PBS重悬细胞,再900-1000rpm(约150g)离心3min,用新鲜的*培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
- 细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。
- 细胞生长缓慢时,可以选择提高血清浓度培养(高不超过20%),也可以根据细胞生长状态,选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。
- 不同细胞贴壁性差异比较大,所以消化时间差别较大,20s-10min均有可能,具体以细胞消化到相互分离但未脱落,并可以轻轻吹下为准,严禁消化到细胞*漂浮。客户消化过度导致细胞死亡、漂浮、生长缓慢,不提供免费售后服务。
- 干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳,我方不提供免费售后服务。
- 细胞状态正常时,应尽快冻存细胞保种,冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责,客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。
Notice:
客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们,细胞收到后1周内没有任何电话,或其他形式回访,默认为细胞质量没问题,之后出了任何问题不给予免费售后。细胞免费售后只提供一次,若重发后再次培养死亡不再免费补发,细胞收货时已经死亡或密度不足的除外。
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